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robert-xn

银虫 (小有名气)

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[求助] 使用亚硫酸氢钠测序法测试基因CpG甲基化

各位仁兄，麻烦问一下有人用亚硫酸氢钠测序法测试过基因CpG甲基化么，因为用亚硫酸盐处理的时候片段会断裂，所以想问问它可以PCR的片段范围一般是多少啊，可以达到600bp么？多谢了

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天高任鸟飞

1楼 2011-08-19 09:09:25

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spiderboy

金虫 (正式写手)

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专业: 生物化学

引用回帖:

188559楼: Originally posted by lyqifeih at 2011-08-20 09:26:48
BSPCR 还是比较好做的，按照说明书就行。PCR产物不宜直接送出去测序，最好转到细菌中过表达下，然后挑斑，每个PCR产物只是挑20，摇菌，送2ml菌液测序，我天天帮人干这活。这样就可以了。做甲基化，还要做MSPCR。...

你好，我现在也在尝试做BSPCR。做好几天了，都么没有扩出片段来。
我用的试剂盒是EZ DNA Methylation-Gold™ Kit 和Epigentek。
基因组也是用试剂盒提出来的，质量还行。
引物是文献上面已用的引物。
但是做了好多次，都没有扩出任何片段。请问哪里可能出问题？