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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 离子交换层析（deae-纤维素）出峰差异很大（有图谱）
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by alexlv at 2011-08-26 22:05:21:
这样的纯化方法太老了，当然我不反对这样做。 换一根柱子或者再加一根柱子就能解决问题了。

另外，强阴或者弱阴离子柱跟分离效果没关系，而是对pH范围的耐受不同来分的。

您的意思是换填料或者纯化两遍？那要是不用这种老的方法用什么比较好啊？
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21楼2011-08-27 09:34:53
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alexlv

银虫 (小有名气)
如果你要纯化出很纯的酶出来，一种填料如果达不到你的要求，就在此基础上，再用别的填料纯化。 我的主要意思是：现在还少在一个柱子或者一种填料上反复试各种条件，除非你是在优化工艺。
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22楼2011-08-29 12:18:35
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by alexlv at 2011-08-29 12:18:35:
如果你要纯化出很纯的酶出来，一种填料如果达不到你的要求，就在此基础上，再用别的填料纯化。 我的主要意思是：现在还少在一个柱子或者一种填料上反复试各种条件，除非你是在优化工艺。

噢，知道了，谢谢！！
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23楼2011-08-29 22:05:23
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gogocancan

新虫 (小有名气)
感觉还是看不懂，不过我会慢慢研究一下的，我现在也在做这个
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24楼2011-09-26 15:39:25
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飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠
引用回帖:
12楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-08-20 05:36:20:
你的主要峰大概为三个，但是第一个峰是非常靠近0点，说明有很多弱吸附的蛋白质，这些蛋白质可能会被起始缓冲液冲洗下来，现在你没有平衡步骤，所以有可能会影响吸附得稍微强一些的蛋白质出峰，造成蛋白质的重叠。 ...

你好，我现在想做蛋白纯化仪AKTA的，他的日常维护工作，请问我应该主要做什么？我查了一些日常维护需要的试剂，但是我们做计划要把一年的都要做出来，我不知道怎么计算？能把一年的都算出来？
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25楼2012-03-12 09:13:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
25楼: Originally posted by 飞走的希望 at 2012-03-12 09:13:09:
你好，我现在想做蛋白纯化仪AKTA的，他的日常维护工作，请问我应该主要做什么？我查了一些日常维护需要的试剂，但是我们做计划要把一年的都要做出来，我不知道怎么计算？能把一年的都算出来？

我不做维护，想到的只是定期用20%乙醇清洗管道以免生长微生物，不好意思。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
26楼2012-03-13 02:17:58
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mssj300130

铜虫 (小有名气)
注意拉梯度时的柱体积，还有就是如果能够保证回收率，尝试一下稍低一点的pH值，尝试一下直接洗脱，看看纯度
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27楼2012-04-10 15:00:36
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