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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
20楼: Originally posted by alexlv at 2011-08-26 22:05:21:
这样的纯化方法太老了,当然我不反对这样做。 换一根柱子或者再加一根柱子就能解决问题了。

另外,强阴或者弱阴离子柱跟分离效果没关系,而是对pH范围的耐受不同来分的。

您的意思是换填料或者纯化两遍?那要是不用这种老的方法用什么比较好啊?
21楼2011-08-27 09:34:53
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alexlv

银虫 (小有名气)

如果你要纯化出很纯的酶出来,一种填料如果达不到你的要求,就在此基础上,再用别的填料纯化。 我的主要意思是:现在还少在一个柱子或者一种填料上反复试各种条件,除非你是在优化工艺。
22楼2011-08-29 12:18:35
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by alexlv at 2011-08-29 12:18:35:
如果你要纯化出很纯的酶出来,一种填料如果达不到你的要求,就在此基础上,再用别的填料纯化。 我的主要意思是:现在还少在一个柱子或者一种填料上反复试各种条件,除非你是在优化工艺。

噢,知道了,谢谢!!
23楼2011-08-29 22:05:23
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gogocancan

新虫 (小有名气)

感觉还是看不懂,不过我会慢慢研究一下的,我现在也在做这个
24楼2011-09-26 15:39:25
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飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

引用回帖:
12楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-08-20 05:36:20:
你的主要峰大概为三个,但是第一个峰是非常靠近0点,说明有很多弱吸附的蛋白质,这些蛋白质可能会被起始缓冲液冲洗下来,现在你没有平衡步骤,所以有可能会影响吸附得稍微强一些的蛋白质出峰,造成蛋白质的重叠。 ...

你好,我现在想做蛋白纯化仪AKTA的,他的日常维护工作,请问我应该主要做什么?我查了一些日常维护需要的试剂,但是我们做计划要把一年的都要做出来,我不知道怎么计算?能把一年的都算出来?
25楼2012-03-12 09:13:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
25楼: Originally posted by 飞走的希望 at 2012-03-12 09:13:09:
你好,我现在想做蛋白纯化仪AKTA的,他的日常维护工作,请问我应该主要做什么?我查了一些日常维护需要的试剂,但是我们做计划要把一年的都要做出来,我不知道怎么计算?能把一年的都算出来?

我不做维护,想到的只是定期用20%乙醇清洗管道以免生长微生物,不好意思。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
26楼2012-03-13 02:17:58
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mssj300130

铜虫 (小有名气)

注意拉梯度时的柱体积,还有就是如果能够保证回收率,尝试一下稍低一点的pH值,尝试一下直接洗脱,看看纯度
27楼2012-04-10 15:00:36
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