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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 毕赤酵母发酵上清液——脱色素？？
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erluoshi

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2011-08-17 15:39:19
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, MicEPI+1): 鼓励 2011-09-01 17:33:41
引用回帖:
1楼: Originally posted by erluoshi at 2011-08-17 15:39:19:
大家好，请教思路
    毕赤酵母上罐发酵生产细胞外产物，得到了广泛的应用。我用无机培养基上罐发酵，得到的是黄绿色的发酵上清液，经过了分离柱的分离纯化，色素还是存在。
    色素成分有谁研究了解没？
  ...

将上述洗脱液中淀粉酶活力明显的洗脱液合并，脱盐，用HiTrap Q CV=1ml 强阴离子交换层析（程序为20mM Tris-HCl缓冲液、1M NaCl、40cv、0-100%B、流速1ml/min、洗脱收集液为每管2ml）（图1），可以看出淀粉酶所处的洗脱液（图2）中色素较少（图3），蛋白质也还没到最大量被洗脱的时候，还是有一些分离效果的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
20楼2011-09-01 03:57:23
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
活性炭吸附，离心去除活性炭
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2楼2011-08-17 16:12:25
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

活性碳也吸蛋白的吧！！建议你用超滤的方法吧，可以同时置换缓冲液和浓缩
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3楼2011-08-17 22:46:40
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
3楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-08-17 22:46:40:
活性碳也吸蛋白的吧！！建议你用超滤的方法吧，可以同时置换缓冲液和浓缩

活性炭确实也吸附蛋白质的，但很多方法都会造成蛋白质的损失，另外，楼主说的是“细胞外产物”，不知道是蛋白质还是什么东西，要是分子量比较小，你的超滤就不起作用了。
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4楼2011-08-18 00:15:50
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