24小时热门版块排行榜    

查看: 4303  |  回复: 23
本帖产生 4 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

erluoshi

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+9, MicEPI+1): xxrxjl o~ 2011-08-19 00:12:56
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-08-17 16:12:25:
活性炭吸附,离心去除活性炭

活性炭品牌不同,孔径也不同,吸附的物质大小也不同,但是很多厂家都不在外包装上标明的。

我曾经使用过几种活性炭来吸附我的粗酶液中的色素,但是效果都不算太好,酶活力会有损失。吸附时间久了,会把酶也吸附,我试过吸附10分钟和过夜的,结果过夜的酶损失稍大。

由于色素不重,所以加2%(W/V)处理,结果有一种活性炭可以去除一半色素,酶损失5%。由于活性炭也会占体积,所以如果用量太大,吸附的蛋白质会更多,所以别加太多。

由于活性炭不能经由离心完全去除,会造成OD600提高,所以从图中可以看出有的处理是OD600比原来酶液还高的。离心后用滤膜过滤,能把活性炭颗粒除去,OD600就会进一步下降。

我的对照为“原酶液不添加活性炭”,使用的活性炭分别为“粒状(天津市北长方正试剂厂,500g)”、“汕头市达濠精细化学品,500g”、“广东省台山市化工厂,500g,批号20080501”、“糖用活性炭”,如果你能买得到多个品种的活性炭,不妨也做一下我的这个实验。





流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
12楼2011-08-18 23:53:26
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

活性炭吸附,离心去除活性炭
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-08-17 16:12:25
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

活性碳也吸蛋白的吧!!建议你用超滤的方法吧,可以同时置换缓冲液和浓缩
3楼2011-08-17 22:46:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
3楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-08-17 22:46:40:
活性碳也吸蛋白的吧!!建议你用超滤的方法吧,可以同时置换缓冲液和浓缩

活性炭确实也吸附蛋白质的,但很多方法都会造成蛋白质的损失,另外,楼主说的是“细胞外产物”,不知道是蛋白质还是什么东西,要是分子量比较小,你的超滤就不起作用了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-08-18 00:15:50
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见