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silicare

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5楼: Originally posted by biolinkphila at 2011-08-17 09:42:03:
问个问题,有没有做过免疫组化双染的呢?用国产抗体可以做出好结果吗?

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7楼: Originally posted by Jack_Y at 2011-08-17 17:16:43:
【1】做免疫组化用的抗体哪个品牌的最好?质量+价格;

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9楼: Originally posted by happy365and366 at 2011-08-17 18:28:58:
请问做荧光的载玻片盖玻片该怎样处理才可以把片片上的荧光物质去掉啊,谢谢

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17楼: Originally posted by ahnuzh at 2011-08-21 16:44:17:
有没有做冰冻切片的?一般组织切片厚度多少才最好?

[ Last edited by silicare on 2011-8-30 at 15:05 ]
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lstt09nk(金币+3): 感谢交流 2011-08-17 12:32:13
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3楼: Originally posted by limichuan at 2011-08-16 23:04:30:
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定 ...

免疫组化的概念出现的比较早,因为当初能做到通过免疫学方法在组织切片上化学显色已经是很大的进步了

后来发展到楼上说的免疫细胞化学

以及现在更普遍采用的免疫荧光

都是通过免疫学方法在组织或更微观的细胞上特异显色,应该都算作广义的免疫组化吧
4楼2011-08-17 08:27:00
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20楼2011-08-30 15:25:22
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33楼: Originally posted by 浩之山 at 2011-10-26 16:37:39:
请教:我做免疫组化用的是SP法,一抗稀释浓度为1:100,做了脑、肝脏和肾脏组织,都有比较严重的背景色,是什么原因呢

你的封闭是怎么做的,背景的原因封闭占了大半,另外,SP法灵敏度比较高,一抗可以稀释度大一些
34楼2011-10-26 16:46:03
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36楼: Originally posted by 浩之山 at 2011-10-29 13:09:58:
用的是福州迈新试剂盒,按照说明书,0.3%H2O2 10分钟,血清封闭15分钟,一直背景色都很重,后来我又换成了迈新的即用型非生物素免疫组化EliVision plus检测试剂盒 ,一抗稀释到1:200,4度过夜,也用0.3%H2O2封闭  ...

可能性很多,需要一一排查才行
一是内源性酶,看看是不是双氧水失效(可以看看不加抗体的阴性对照)
二是封闭液,多大浓度的血清(可以试着加大封闭力度)
三是抗体稀释比例需要优化,尤其是用SP或ABC的就更需要了(多做几张预实验看看不同稀释度的效果)
第四就是看看有没有洗干净
欢迎其他同胞补充
37楼2011-11-03 08:06:00
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