开一个【免疫组化】专贴 - 生物科学 - 第4页小木虫论坛-学术科研互动平台

31楼2011-10-10 10:10:29

lipei98989

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 691.7
散金: 26
红花: 1
帖子: 226
在线: 142.6小时
虫号: 1408821
注册: 2011-09-20
性别: GG
专业: 兽医免疫学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

好诶！开革免疫组化的专区不错，我马上就要免疫组化方面的啦，之前做过内分泌细胞的嗜银染色，希望能在这里面多多交流交流！！！

32楼2011-10-11 17:36:31

浩之山

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 29
红花: 2
帖子: 14
在线: 5.9小时
虫号: 1421351
注册: 2011-09-28
性别: MM
专业: 兽医药理学与毒理学

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+8): 鼓励新虫发帖交流 2011-10-26 16:45:06

请教：我做免疫组化用的是SP法，一抗稀释浓度为1:100，做了脑、肝脏和肾脏组织，都有比较严重的背景色，是什么原因呢

赞一下(2人)

wherethereisawill,thereisaway

33楼2011-10-26 16:37:39

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

BioEPI: 14
应助: 88 (初中生)
贵宾: 29.823
金币: 18946.3
散金: 24272
红花: 300
沙发: 88
帖子: 10222
在线: 1602.6小时
虫号: 948825
注册: 2010-01-26
专业: 摩尼教
管辖: 新药研发

引用回帖:

33楼: Originally posted by 浩之山 at 2011-10-26 16:37:39:
请教：我做免疫组化用的是SP法，一抗稀释浓度为1:100，做了脑、肝脏和肾脏组织，都有比较严重的背景色，是什么原因呢

你的封闭是怎么做的，背景的原因封闭占了大半，另外，SP法灵敏度比较高，一抗可以稀释度大一些

赞一下

34楼2011-10-26 16:46:03

zlee2136

木虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2277.6
红花: 2
帖子: 31
在线: 102.5小时
虫号: 1374598
注册: 2011-08-20
专业: 生物大分子结构与功能

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

请问：IFIHC ICC IP 在免疫学中各代表什么意思？谢谢！

35楼2011-10-26 23:09:34

浩之山

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 29
红花: 2
帖子: 14
在线: 5.9小时
虫号: 1421351
注册: 2011-09-28
性别: MM
专业: 兽医药理学与毒理学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

用的是福州迈新试剂盒，按照说明书，0.3%H2O2 10分钟，血清封闭15分钟，一直背景色都很重，后来我又换成了迈新的即用型非生物素免疫组化EliVision plus检测试剂盒，一抗稀释到1:200,4度过夜，也用0.3%H2O2封闭 10分钟，可是最后非特异性背景色还是很严重，是什么原因呢

wherethereisawill,thereisaway

36楼2011-10-29 13:09:58

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

BioEPI: 14
应助: 88 (初中生)
贵宾: 29.823
金币: 18946.3
散金: 24272
红花: 300
沙发: 88
帖子: 10222
在线: 1602.6小时
虫号: 948825
注册: 2010-01-26
专业: 摩尼教
管辖: 新药研发

引用回帖:

36楼: Originally posted by 浩之山 at 2011-10-29 13:09:58:
用的是福州迈新试剂盒，按照说明书，0.3%H2O2 10分钟，血清封闭15分钟，一直背景色都很重，后来我又换成了迈新的即用型非生物素免疫组化EliVision plus检测试剂盒，一抗稀释到1:200,4度过夜，也用0.3%H2O2封闭 ...

可能性很多，需要一一排查才行
一是内源性酶，看看是不是双氧水失效（可以看看不加抗体的阴性对照）
二是封闭液，多大浓度的血清（可以试着加大封闭力度）
三是抗体稀释比例需要优化，尤其是用SP或ABC的就更需要了（多做几张预实验看看不同稀释度的效果）
第四就是看看有没有洗干净
欢迎其他同胞补充

赞一下

37楼2011-11-03 08:06:00