| 查看: 1167 | 回复: 5 | |||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | |||
[求助]
禽流感的分离方法
|
|||
| 请各位指点一二： 我从鸭场采集的病料分离禽流感病毒（临床疑似禽流感），第一次未分离到病毒，第二次我采集了 肝 脾 心脏 脑 还是未分离到病毒。请问这是为什么呢？ 分离病毒的方法都有哪些呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
366求调剂
已经有9人回复
-
材料工程085601，270求调剂
已经有37人回复
-
279学硕食品专业求调剂院校
已经有18人回复
-
290调剂生物0860
已经有31人回复
-
一志愿085802 323分求调剂
已经有13人回复
-
277求调剂
已经有23人回复
-
322求调剂，08工科
已经有4人回复
-
材料工程281还有调剂机会吗
已经有30人回复
-
化学070300 求调剂
已经有16人回复
-
化工学硕294分，求导师收留
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助油水分离方法
已经有12人回复
- 为什么我做禽流感H9型感染MDCK细胞不成功？
已经有7人回复
- 【求助】有了解福建农科院畜牧兽医研究所的黄瑜研究员的吗？
已经有5人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
rainwander(金币+4): 鼓励交流 2011-08-17 07:12:50
04swlxy(金币+10): 回帖很仔细，内容很有用 2011-10-21 19:55:07
zhang8826857(MicEPI+1): lz反馈很有用，奖励EPI一个^_^继续努力啊^_^ 2011-10-22 10:29:16
rainwander(金币+4): 鼓励交流 2011-08-17 07:12:50
04swlxy(金币+10): 回帖很仔细，内容很有用 2011-10-21 19:55:07
zhang8826857(MicEPI+1): lz反馈很有用，奖励EPI一个^_^继续努力啊^_^ 2011-10-22 10:29:16
| 采集气管粘液或泄殖腔粘液，或病变组织（呼吸道、消化道），加纯水制作匀浆（10％悬液），低速冷冻离心机（台式或立式均可）3,000~4,000rpm, 4℃～5℃，15～20分，弃沉淀，即得到粗制的病毒液，可用负染法处理（用毛细管吸取悬液，滴在带有支持膜的铜网上，根据悬液内样品的浓度可立即或放置数分钟后，用滤纸从液珠边缘吸去多余液体，然后滴上负染液（常用重金属盐配置：如PTA（磷钨酸）、KPT（磷钨酸钾）、NaPT (磷钨酸钠)、醋酸钠、甲酸钠、钼酸铵等等）、染色时间1～2分钟，然后用滤纸吸去染液，待干燥后上透射电镜观测。如果粗制液中病毒成份极少，透射电镜观测不到，则可把悬液用离心浓缩仪浓缩；或用超速离心机，固定角式转头40,000rpm ×45 分钟，5℃取沉淀制成悬液上电镜观测。或用40,000rpm的甩平转头，30％～50％W/W 线性蔗糖梯度32,000rpm×50 分，5℃，病毒集聚在1.15～1.18g/cm3之间的某个位置形成纯样品区带；或用Ficoll,30％～40％W/W 线性梯度，病毒沉降在1.13～1.15g/cm3之间；或用Percoll作平衡等密度离心，自形成梯度，病毒悬液与Percoll混合，初始密度1.05g/cm3，用0.01M Tris-HCL作渗透平衡液，日立超速离心甩平转头P28S（上海天美肯公司购自）或SW28（贝克曼）转头，20,000rpm×30分钟，5℃。病毒在1.06 g/cm3附近形成纯样品区带。当然，也可以用溴化钠（钾）或碘化钠（钾）梯度进行禽流感病毒的纯化。 |
2楼2011-08-16 13:47:10
3楼2011-08-16 13:49:59
4楼2011-08-16 21:11:04
10710010234
铁虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 18.4
- 帖子: 158
- 在线: 35.8小时
- 虫号: 891541
- 注册: 2009-11-02
- 性别: GG
- 专业: 微生物药物
5楼2012-08-04 22:54:55
无疆@行者
银虫 (小有名气)
- 应助: 60 (初中生)
- 金币: 241.8
- 散金: 362
- 帖子: 288
- 在线: 214.6小时
- 虫号: 1416887
- 注册: 2011-09-25
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
6楼2012-09-08 02:19:15
