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菜鸟问题：细胞保存在液氮罐液相还是气相中？
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我们实验室刚开始做培养细胞的实验。我们以前都是保存在-76度的冰箱里面，这样可行吗？现在我们买了一个Thermo 的CY50900液氮罐，在说明书中是这样说的： Storing Samples in Vapor Phase 1. Remove the 2 bottom-most cryoboxes from each rack. 2. Measure the height of 2 cryoboxes stacked on top of each other. 3. Fill vessel with liquid nitrogen to the height obtained from step 2 using a yardstick to measure liquid level in vessel. 4. Place racks into vessel without the 2 bottom-most cryoboxes. — Samples are now above the liquid nitrogen and are stored in the vapor phase.— Important—A level monitor should always be used when you store your samples in the vapor phase because of the already low levels of liquid nitrogen. Please refer to page 10 for the correct level monitor for your system. 也就是说细胞要储存在气态中，但是我看网上说的培养技术细胞都是冻存在液相里的。那么到底应该把细胞放在哪里呢？ |
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Chlo_Q
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【答案】应助回帖
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silicare: 金币+5, BioEPI+1, 应助指数+1, 谢谢分享 2012-05-02 13:09:27
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 应助指数+1, 谢谢分享 2012-05-02 13:09:27
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细胞冻存，一般是缓慢降温；复苏时则是快速解冻，这样养出来的细胞状态才好 缓慢降温，我们一般放到冻存管后，先放4度一两小时，再在-20一两小时，再转到-40（或直接置-70）放置数小时后就可以直接置液氮里了。 一个博士师姐曾分享的方法则是，先降至-20度后，悬在液氮罐用蒸气降温，慢慢放低，最后再泡进去。不过比较讲技术，因为有一次她降太快了，直接碰到液氮，后来那管细胞复苏后状态就差很多 还有冻存液的用量也可以自己摸索，不一定再用那么多的，毕竟那东西对细胞也是有伤害的。复苏后也要尽快除去它 一点点经验分享，我现在转行了，能分享的也不多，只是一些印象深刻的东西了 |
6楼2012-05-02 12:56:57