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yuten

银虫 (小有名气)

[求助] 关于紫外诱变霉菌

看文献,有些诱变前制作单孢子悬浮液进行诱变,有的是先制成原生质体再进行诱变。请问:1.孢子悬浮液诱变的效果会差很多吗?2.先制成原生质体再进行诱变后,红光下稀释涂布平板,然后避光培养是为了让原生质体再生吗?
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+9, MicEPI+1): 谢谢热心回复 2011-08-05 20:17:09
yuten(金币+3): 谢谢 2011-08-06 19:46:48
yuten(金币+1): 2011-08-08 15:34:38
针对你的问题,回答如下:

1)理论上来说,原生质体由于去除了大部分的细胞壁,对紫外线更加敏感,所以诱变的效率更高一些。但是由于原生质体存在制备比较困难,还有受到再生条件的影响,所以实际上哪种方法更好也说不清楚。而且由于诱变是个随机事件,有时候运气也很重要。

2)先制成原生质体再进行诱变后,红光下稀释涂布平板,然后避光培养是为了让原生质体再生吗?

不是,红光下稀释涂布平板和避光培养,是防止基因的回复突变。可见光会引起光复活作用。由于在一般的微生物中都存在着光复活作用,所以在进行紫外线诱变育种时,只能在红光下进行照射及处理照射后的菌液。

光复活作用: 把经紫外线照射后的微生物立即暴露于可见光下时,可明显降低其死亡率的现象,称为光复活作用。光复活由 phr 基因编码的光解酶 PHr 进行。 PHr 在黑暗是专一性地识别嘧啶二聚体,并与之结合,形成酶 -DNA 复合物,当给予光照时,酶利用光能( PHr 本身无发色基团,与损伤的 DNA 结合后才能吸收光,起光解作用)将二聚体拆开,恢复原状,酶再释放出来。
2楼2011-08-05 13:24:24
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-08-05 19:03:05
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