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独处静隅

金虫 (小有名气)

[求助] 流动相重现性问题

各位大侠,小女子在此有礼了,最近老师让我重现师姐(已毕业)以前课题的含量测定方法(HPLC测定),波长200,流速0.6ml/min,流动相为0.03M硫酸铵(H3PO4调pH至3.0):乙腈=60:40,但是我配的流动相出现了很多杂峰,与师姐配置的相差很大,溶剂峰影响了药物峰积分,我已经把瓶子洗的非常干净了,流动相也抽了很多遍,配置方法也和师姐是一样的,实在是不知道什么原因导致的,特向各位大侠求教,先谢谢各位了!






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专家顾问 (职业作家)


karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-08-11 00:31:04
引用回帖:
1楼: Originally posted by 独处静隅 at 2011-08-03 21:39:15:
各位大侠,小女子在此有礼了,最近老师让我重现师姐(已毕业)以前课题的含量测定方法(HPLC测定),波长200,流速0.6ml/min,流动相为0.03M硫酸铵(H3PO4调pH至3.0):乙腈=60:40,但是我配的流动相出现了很多 ...

我做的一个项目也遇到过相似的问题。200nm的波长太短了,你的药物的紫外吸收响应那么低?我分析的药物的响应因子很低,波长210nm,浓度有1mg/ml,进液相的。我觉得你可以进样前冲冲仪器通道与检测器。我的项目冲仪器与不冲仪器跑出来的峰差很多的。你不妨试试。
另外,不知你用的什么水,最好用超纯水,尽量避免可能的干扰。
水滴石穿!!
7楼2011-08-10 12:38:53
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查看全部 8 个回答

独处静隅

金虫 (小有名气)

不好意思,忘记命名了,1溶剂峰(师姐配置)2溶剂峰(我配置)3药物峰(师姐配置)4药物峰(我配置)
2楼2011-08-03 21:43:26
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zyzhang18

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


中药2000(金币+1): 谢谢。 2011-08-04 09:43:29
独处静隅(金币+10): 呵呵,谢谢 2011-08-05 15:14:02
会不会和水有关系呐,200的波长实在是很低呀
3楼2011-08-04 09:06:32
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einorain

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

200是末端吸收,紫外条件下无法准确测定,另外你的色谱柱在使用前是否冲洗干净
4楼2011-08-05 08:52:31
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