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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 流动相重现性问题
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独处静隅

金虫 (小有名气)

[求助] 流动相重现性问题

各位大侠，小女子在此有礼了，最近老师让我重现师姐（已毕业）以前课题的含量测定方法（HPLC测定），波长200，流速0.6ml/min，流动相为0.03M硫酸铵（Ｈ３ＰO4调pH至3.0）：乙腈=60:40，但是我配的流动相出现了很多杂峰，与师姐配置的相差很大，溶剂峰影响了药物峰积分，我已经把瓶子洗的非常干净了，流动相也抽了很多遍，配置方法也和师姐是一样的，实在是不知道什么原因导致的，特向各位大侠求教，先谢谢各位了！
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1楼 2011-08-03 21:39:15
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News

专家顾问 (职业作家)
★
karl2100(金币+1): 谢谢！ 2011-08-11 00:31:04
引用回帖:
1楼: Originally posted by 独处静隅 at 2011-08-03 21:39:15:
各位大侠，小女子在此有礼了，最近老师让我重现师姐（已毕业）以前课题的含量测定方法（HPLC测定），波长200，流速0.6ml/min，流动相为0.03M硫酸铵（Ｈ３ＰO4调pH至3.0）：乙腈=60:40，但是我配的流动相出现了很多 ...

我做的一个项目也遇到过相似的问题。200nm的波长太短了，你的药物的紫外吸收响应那么低？我分析的药物的响应因子很低，波长210nm，浓度有1mg/ml，进液相的。我觉得你可以进样前冲冲仪器通道与检测器。我的项目冲仪器与不冲仪器跑出来的峰差很多的。你不妨试试。
另外，不知你用的什么水，最好用超纯水，尽量避免可能的干扰。
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水滴石穿！！
7楼2011-08-10 12:38:53
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查看全部 8 个回答

独处静隅

金虫 (小有名气)
不好意思，忘记命名了，1溶剂峰（师姐配置）2溶剂峰（我配置）3药物峰（师姐配置）4药物峰（我配置）
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2楼2011-08-03 21:43:26
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zyzhang18

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
中药2000(金币+1): 谢谢。 2011-08-04 09:43:29
独处静隅(金币+10): 呵呵，谢谢 2011-08-05 15:14:02
会不会和水有关系呐，200的波长实在是很低呀
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3楼2011-08-04 09:06:32
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einorain

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

200是末端吸收，紫外条件下无法准确测定，另外你的色谱柱在使用前是否冲洗干净
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4楼2011-08-05 08:52:31
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