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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

[交流] 有做植物反义基因的吗 交流一下已有5人参与

最近老板让我做植物反义基因,很不懂,双元表达载体中为什么要连正义反义两条链??只连一个反义链不可以吗?
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free-fish

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
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13楼: Originally posted by a3yangfei at 2011-08-06 20:22:20:
既然已经是保守序列的话,我的东西即使是片段性的,是不是可以用别的物种的这个保守序列做家族干扰呢?? 真是很谢谢你的呀,帮我解决困难!!

你确定你所研究的物种的基因和别的物种在序列上是保守的吗?比如,可以以别的物种的保守区段设计引物扩一下试一试,如果能扩出来,而且测序的结果也支持的话就更好,虽然不是该基因的完整片段。想拿到完整片段的话,也有很多的办法,当然这是另外的话题了。

在确认上面的情况下,你就可以用保守区段来进行干涉了。也就是,用自己所研究的物种的保守区段设计为干涉区段。比如,你所研究的是玉米,你用水稻的保守区段来干涉玉米,这在实验的逻辑性上就说不过去,虽然也可能达到干涉的效果,毕竟是保守嘛!所以,你还是应该用玉米的保守区段来做。

以上是个人意见,请斟酌行事。
14楼2011-08-07 10:57:09
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changes

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
xiaohouo0(金币+2): 鼓励积极交流 2011-08-02 14:21:55
应该是想做基因超量和抑制吧,构建载体时都一样,就是工作量加倍了。对了,你们是什么植物,转化体系成熟吗?
2楼2011-07-26 15:40:33
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free-fish

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
xiaohouo0(金币+2): 鼓励积极交流 2011-08-02 14:22:32
引用回帖:
Originally posted by a3yangfei at 2011-07-26 12:39:47:
最近老板让我做植物反义基因,很不懂,双元表达载体中为什么要连正义反义两条链??只连一个反义链不可以吗?

同时连正义和反义是为了做干涉载体,做RNAi的
3楼2011-07-26 17:57:36
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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by free-fish at 2011-07-26 17:57:36:
同时连正义和反义是为了做干涉载体,做RNAi的

只有连反义基因 达不到抑制的作用吗
4楼2011-07-26 22:32:15
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