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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做SRAP标记的进来，DNA聚丙烯酰胺电泳，预电泳问题。。。
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-22 20:49:53:
没有冷却装置，有什么方法可以替代，求教...

楼上有童鞋说整个放4℃冷柜里的...这个真的有，我亲眼见过，效果貌似还不错。就是搬来搬去的麻烦，而且...电源线要够长。
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11楼2011-07-23 08:42:32
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changes

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
墨池(金币+2): 2011-07-23 13:00:41
西瓜(金币+5, EPI+1): Good！ 2011-07-23 17:32:18
引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-22 14:46:11:
DNA，SRAP标记，6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 的预电泳问题：
1  预电泳电压，时间？
2  预电泳好处？
3 为什么同一块胶，两侧的泳道跑的慢，中间跑的快。我们的电泳槽没冷却装置，普通型号的。DYCZ-21型号。
...

建议老板买专门的测序电泳系统，国产的我们用DYCZ-20C 和DYCZ-20C 两种DNA序列分析电泳仪，你提到的DYCZ-21属于多功能的电泳系统，做SREP多态性分析效果会差些。当然了你如果充分掌握了仪器的使用或实验室有前人做过具有成熟的体系也是可以的。
1.预电泳的电压和时间根据不同的仪器有差别，值得一提的是预电泳的功率或电压要比正式电泳是要高一些。
2.预电泳的作用：1.加热胶（使用的是TBE缓冲液） 2.通过预电泳“冲洗”胶空、分子筛，使聚丙烯胶干净，从而使分离效果更好。
3. 可能原因：1.灌胶前没有将TEMED、过硫酸铵与胶充分混匀，2.两块玻璃板受力不匀，3.玻璃板已经变形，不平了。
祝好运。
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12楼2011-07-23 11:27:17
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墨池

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by changes at 2011-07-23 11:27:17:
建议老板买专门的测序电泳系统，国产的我们用DYCZ-20C 和DYCZ-20C 两种DNA序列分析电泳仪，你提到的DYCZ-21属于多功能的电泳系统，做SREP多态性分析效果会差些。当然了你如果充分掌握了仪器的使用或实验室有前 ...

DYCZ-20C和哪个型号？您贴了两个一样滴(*^__^*) 嘻嘻……
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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！
13楼2011-07-23 13:01:14
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墨池

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jyongchao at 2011-07-23 02:00:27:
同一块胶中间快两侧慢，也有可能是胶的底部两侧有气泡

排除气泡原因，是温差造成的(*^__^*) 嘻嘻……
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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！
14楼2011-07-23 13:02:56
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changes

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-23 13:01:14:
DYCZ-20C和哪个型号？您贴了两个一样滴(*^__^*) 嘻嘻……

呵呵，对不起啊，是DYCZ-20C和DYCZ-20B两个型号，一个宽板、较短，适合样品较多的片段不是特别多的如SSR等标记；一个窄版、较长，适合AFLP等标记。SRAP两种都可以，只是跑电泳时要注意调整功率、时间。
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15楼2011-07-23 19:28:49
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墨池

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by changes at 2011-07-23 19:28:49:
呵呵，对不起啊，是DYCZ-20C和DYCZ-20B两个型号，一个宽板、较短，适合样品较多的片段不是特别多的如SSR等标记；一个窄版、较长，适合AFLP等标记。SRAP两种都可以，只是跑电泳时要注意调整功率、时间。

谢谢哦，查了查，价位还不贵
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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！
16楼2011-07-24 14:44:36
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qidannvzi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-07-22 16:59:20:
楼主最近提问很多啊，呵呵~

没有冷却装置很正常，一般都拿冰块去降温：拿个大盘子，先铺一层冰，然后放上电泳槽，最后再用尽可能多的冰块把电泳槽埋起来，当然，别盖过顶，不然冰融了水会流进去。隔段时间检查 ...

我想问的是，你们跑6%的聚丙烯酰胺用的是垂直板吗，我怎么觉得干的活一样，方法差这么多啊。我的也没有冷却装置什么的啊？
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准备跨新年！
17楼2011-12-02 08:12:59
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by qidannvzi at 2011-12-02 08:12:59:
我想问的是，你们跑6%的聚丙烯酰胺用的是垂直板吗，我怎么觉得干的活一样，方法差这么多啊。我的也没有冷却装置什么的啊？

也用的垂直板啊。可能电压不一样吧
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18楼2011-12-02 10:24:32
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xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

请问你做SRAP标记，用的材料是什么呢，条带怎么样？
对于冷却问题，我们是用个小电风扇吹着，效果比较好。夏天就放空调下面，再用电扇吹着。希望对你有帮助。
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19楼2011-12-02 11:37:02
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qidannvzi

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
18楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-12-02 10:24:32:
也用的垂直板啊。可能电压不一样吧

我跑的电压是1500伏！你的呢？
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准备跨新年！
20楼2011-12-03 08:01:40
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