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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做SRAP标记的进来，DNA聚丙烯酰胺电泳，预电泳问题。。。
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by changes at 2011-07-23 11:27:17:
建议老板买专门的测序电泳系统，国产的我们用DYCZ-20C 和DYCZ-20C 两种DNA序列分析电泳仪，你提到的DYCZ-21属于多功能的电泳系统，做SREP多态性分析效果会差些。当然了你如果充分掌握了仪器的使用或实验室有前人 ...

跑SRAP标记还需要用测序胶，简直就是拿大炮打蚊子！

一，5个螺丝要拧平衡，中间的那个不要太紧
二，电压不要超过200，150最好
三，刚凝固要过半个小时后再点
四，最边上的孔不要点
五，没有必要用冰什么的。
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真相是最大的奢侈品
21楼2011-12-03 09:01:57
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阿德54007

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

第一个问题：对于预电泳，作用一，是为了除去没有聚合完全的丙烯酰胺分子和交联剂。作用二，就是预电泳的时候在点样孔两边及中间约4~5孔，加入Buffer，检验胶的质量。正常情况下，预电泳结束后几个条带应该基本在一条直线上。作用三，据说是为了预热胶。
第二个问题：预电泳的电压，这个不确定，要根据电泳槽和实验的实际情况来看。有的电泳槽是恒压，有的是恒功率。预电泳时间控制在30min左右。
第三个问题：两边条带弯曲是正常现象，即所谓的“边缘效应”。条带过分弯曲的话，就有问题了，一种原因可能就是在电泳的时候胶板过热，还有可能就是缓冲液缓冲质量下降，更换新的缓冲液。至于楼上的说的漏电问题，个人认为，可能性很低。
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
22楼2011-12-03 09:46:42
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水晶海豚00

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
577943楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-07-22 16:59:20
楼主最近提问很多啊，呵呵~

没有冷却装置很正常，一般都拿冰块去降温：拿个大盘子，先铺一层冰，然后放上电泳槽，最后再用尽可能多的冰块把电泳槽埋起来，当然，别盖过顶，不然冰融了水会流进去。隔段时间检查下 ...

想请问下前辈，是预电泳时要冰浴吗？还是正式电泳？不冰浴的话会有什么影响吗？
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用心生活，就会幸福
23楼2012-07-27 23:28:49
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