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676206569

木虫 (正式写手)

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[交流] 【交流】H22腹水瘤保种、体内传代

最近准备用腹水瘤H22做小鼠生命延长率实验，有几个问题没有明白：
1.balb/c小鼠模型成功率大么
2.细胞复苏后就直接打入小鼠腹腔内么？用多少细胞合适？
3.保种的时候，使用小鼠体内传几代的冻存？
4.要是出现血性腹水，怎么办? 初次传代只够一只小鼠的量。
4.这个实验哪些地方值得注意？
5.非常感谢给出宝贵意见。第一次！

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1楼 2011-07-22 10:02:05

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菊花头

木虫 (正式写手)

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676206569(金币+5): 2011-07-22 15:43:26

1 balb/c小鼠可以做，也可以用km鼠做，成功率都可以的。
2 细胞复苏之后要先在老鼠体内传代，2-3次，然后大批量的接种小鼠。一般每只小鼠接种10·6数量级的细胞，各个实验室的细胞活力不一样，你需要预实验，用几个接种量试验一下，看看接种老鼠的存活时间。
3 冻存没有具体要求，只要腹水颜色正常（白色偏黄），细胞活力旺盛就可以冻存。
4 血性腹水，你可以把腹水稀释，稀释的倍数大一些，1：4，1：5这样，然后接种，看看能不能恢复；如果不能那只有重新复苏了。
5 这个实验我觉得要控制好接种量，尽量接种均一，保证实验鼠的腹水生长速度一致，避免模型的个体差异，不能过早的死亡，也不能长时间的长不起来，这样才能反映药物的中位生存期。再一个就是实验动物必须是同一批次的，体重符合标准。具体的要求参看指导原则。