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[交流]
【交流】H22腹水瘤保种、体内传代
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最近准备用腹水瘤H22做小鼠生命延长率实验,有几个问题没有明白: 1.balb/c小鼠模型成功率大么 2.细胞复苏后就直接打入小鼠腹腔内么?用多少细胞合适? 3.保种的时候,使用小鼠体内传几代的冻存? 4.要是出现血性腹水,怎么办? 初次传代只够一只小鼠的量。 4.这个实验哪些地方值得注意? 5.非常感谢给出宝贵意见。第一次! |
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
676206569(金币+5): 2011-07-22 15:43:26
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
676206569(金币+5): 2011-07-22 15:43:26
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1 balb/c小鼠可以做,也可以用km鼠做,成功率都可以的。 2 细胞复苏之后要先在老鼠体内传代,2-3次,然后大批量的接种小鼠。一般每只小鼠接种10·6数量级的细胞,各个实验室的细胞活力不一样,你需要预实验,用几个接种量试验一下,看看接种老鼠的存活时间。 3 冻存没有具体要求,只要腹水颜色正常(白色偏黄),细胞活力旺盛就可以冻存。 4 血性腹水,你可以把腹水稀释,稀释的倍数大一些,1:4,1:5这样,然后接种,看看能不能恢复;如果不能那只有重新复苏了。 5 这个实验我觉得要控制好接种量,尽量接种均一,保证实验鼠的腹水生长速度一致,避免模型的个体差异,不能过早的死亡,也不能长时间的长不起来,这样才能反映药物的中位生存期。再一个就是实验动物必须是同一批次的,体重符合标准。具体的要求参看指导原则。 |
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