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zxtcm

金虫 (初入文坛)

[交流] 为什么液相色谱基线严重漂移? 已有12人参与

情况是这样的:是摸好的条件,对照品和以前的样品没有发生这种情况。

样品使用50%乙醇溶解,流动相为水-乙腈-0.1%甲酸(两相均加),梯度洗脱,从13%的乙腈到60%的乙腈,基线出现上移时即为梯度变化的地方。波长270nm。angilent1260,自动进样,柱温30度。c-18柱15cm。

①怀疑是有色素干扰,但是之前的样品完全没有漂移。

②怀疑检测器灯能量不足,更换后没有变化。

③怀疑预柱问题,拆除预柱没有变化。

④不可能使流动相梯度问题,对照品没有问题。但如果跑完样品在跑对照品会漂。

⑤怀疑色谱柱,更换安捷伦柱第一针没有漂,第二针又出现漂移。

⑥样品澄清,应该没有叶绿素。
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jinglh8288

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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pplover(金币+2): 感谢分享心得。。 2011-07-23 20:04:01
有可能是娃哈哈水的问题,我们之前也出现过类似的情况,是梯度变化完毕后总有一个大峰出现,而且同时基线上漂20个单位左右,后来换了水后,大峰没有了,但是基线波动特别大,基本上在梯度范围内能上漂到150个单位然后又迅速下降到-200个单位,非常让人郁闷。后来冲了系统,工程师也过来了仍然没有改变,可是工程师走后,我换了一根管线,问题都没有了!!让我纠结了一个多月啊……现在都不清楚到底是什么原因,我们也是安捷伦1260,而且是刚安装调试后就出现了一系列的上述问题……
一分耕耘,一分收获。
14楼2011-07-23 17:05:58
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干一行爱一行

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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pplover(金币+2): 合理的建议1。鼓励新虫交流1。。 2011-07-23 20:02:58
有没有可能是这批的PH有问题啊?你做了那么多的排除工作,换一台仪器做,如果还是这样,就只有是样品问题了。
超越一切想超越的人!
2楼2011-07-19 18:39:14
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57revival

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
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pplover(金币+3): 感谢交流。。。 2011-07-23 20:02:29
你做对照的时候都没问题,但做完样品再做对照基线就飘了。所以我觉得应该是样品的问题,楼上说的PH可以考虑哈,但是你说条件都是摸好了都嘛,PH应该考虑在内了。我看你的图谱,响应值怎么这么低,根本没出峰嘛,都40多min了。一般基线飘可能会是:1、柱压不稳。2、柱子不干净了,有杂质。3、柱效降低,基本没柱效。4、柱温箱温度异常。5、泵液不均,可手动测一下泵的精确度。
海纳百川,有容乃大;壁立千仞,无欲则刚。
3楼2011-07-19 20:55:56
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zxtcm

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 干一行爱一行 at 2011-07-19 18:39:14:
有没有可能是这批的PH有问题啊?你做了那么多的排除工作,换一台仪器做,如果还是这样,就只有是样品问题了。

你是说样品的pH值吗?可能性不大,因为就算是pH值变化了,可能出峰时间面积之类会变化,但基线无论如何不会漂成这样。

我一直怀疑有脂溶性色素干扰,在有机相浓度加大时,被洗脱,出现“吸收包”,随后有回落,下一个梯度出现,有机相浓度再次加大,再出现下一个吸收包,随后回落。但是问题是之前的样品没有这种情况,而且是连续进样,两针见有5min初始浓度流动相的平衡。真是见鬼了。

[ Last edited by zxtcm on 2011-7-20 at 14:37 ]
4楼2011-07-19 20:59:12
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