RCR自己怎么都做不出来，但是同样条件下师哥帮着做了，却出来了，求助原因 - 分子生物 - 综合其他

21楼2011-07-20 10:23:56

maomao809920

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Originally posted by beautybanana at 2011-07-18 20:55:03:
同样的条件，熟练的人可以做出来，生手不一定能做的出来，对于新手来说，一般都是加样的问题，很难将少至于0.几ul 的样品加准确，这个最好用移液枪吸水打到PCR管中来联系，在熟练人员的指导下，看0.2ul在枪头什 ...

小离心管都插在冰里面，加样时可以拿出来加样么？会有影响吗？

22楼2011-07-20 10:27:59

maomao809920

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Originally posted by loveskyzhou at 2011-07-20 08:55:48:
感觉可能是因为你刚做生化，用枪加样时因为量小某一个关键成分根本就没加进去（加的时候一定要看着管底，确定哪些一两微升的加到液体里了），所以总没结构，慢慢来，细心就好

加样时，可以从冰中拿出离心管进行加样吗？会不会有影响？

23楼2011-07-20 10:29:21

maomao809920

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Originally posted by boymin2010 at 2011-07-20 09:52:34:
如果你的师兄电泳结果又引物二聚体而你的没有，可以肯定你没有加入引物啦。

又重复做了一遍，下午看结果吧~谢谢帮助啦~~

24楼2011-07-20 10:31:10

loveskyzhou

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Originally posted by maomao809920 at 2011-07-20 10:29:21:
加样时，可以从冰中拿出离心管进行加样吗？会不会有影响？

影响不大的

我会绕一个圈，走回到实验室

25楼2011-07-20 11:03:26

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★ ★
西瓜:编辑内容 2011-07-20 16:20
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-07-20 16:21:09

前面的说的挺好了，我说一下我的意见，加样的时候要由多到少的加，比如说，计算之后发现ddH2O量最大就先加，一次由多到少，酶要后加，再就是看着点东西都加进去。

[ Last edited by 西瓜 on 2011-7-20 at 16:20 ]

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whatafuckingwork

26楼2011-07-20 15:17:34

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27楼2011-07-20 15:52:08

beautybanana

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Originally posted by maomao809920 at 2011-07-20 10:27:59:
小离心管都插在冰里面，加样时可以拿出来加样么？会有影响吗？

小离心管可以先放在冰箱里预冷一下，加样时再拿出来，可以先加其他成分，等加好酶的时候再放到冰上，加好后稍微离心一下就好了。

28楼2011-07-20 17:25:20

thinka

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这也太正常了,同样一篮子菜,有人做出来好吃.有些其实验更明显，要多琢磨,要尊重师兄师姐,才能学到真正实战经验，不是说楼主,实验室最近几级新生明显眼比手高了.

29楼2011-07-21 00:03:26

maomao809920

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Originally posted by 农科院523 at 2011-07-20 15:17:34:
前面的说的挺好了，我说一下我的意见，加样的时候要由多到少的加，比如说，计算之后发现ddH2O量最大就先加，一次由多到少，酶要后加，再就是看着点东西都加进去。

[ Last edited by 西瓜 on 2011-7-20 at 16: ...

又拜托师姐加了一遍样，她也是先加水再加其他的，但是依旧米有跑出来。。。

30楼2011-07-21 09:43:32