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guoting329

银虫 (小有名气)

我也遇到同样的问题,连接转化重复了几遍就是做不出来,可师姐一做就出来了,也是极其的郁闷!!
11楼2011-07-18 20:57:59
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btx362237729

金虫 (正式写手)

貌似主要是移液枪的操作规范问题。。。枪头里面不要有残留
人生最黑暗的时光终于过去了
12楼2011-07-19 09:29:37
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maomao809920

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by btx362237729 at 2011-07-19 09:29:37:
貌似主要是移液枪的操作规范问题。。。枪头里面不要有残留

我也觉得是这个问题 其他方面还真找不到有什么问题
13楼2011-07-19 09:49:28
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maomao809920

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by beautybanana at 2011-07-18 20:55:03:
同样的条件,熟练的人可以做出来,生手不一定能做的出来,对于新手来说,一般都是加样的问题,很难将少至于0.几ul 的样品加准确,这个最好用移液枪吸水打到PCR管中来联系,在熟练人员的指导下,看0.2ul在枪头什 ...

不错!好好学习下,回头拿水练练。

加样时是不是最好打到管底,然后和其他样吸打混匀比较好啊?
14楼2011-07-19 09:55:46
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maomao809920

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2011-07-18 00:36:48:
应该说PCR是最简单的操作了,应该说这个的确有不稳定性因素和运气在里面,但是我觉得主要还是熟能生巧,现在我们都用PCR Mixture 更加简单了,希望你能找点相关试剂盒 PCR mixture 相信能给你带来不少的方便

毕竟才做了2次PCR。。还需多锻炼。。哈哈
15楼2011-07-19 10:02:06
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maomao809920

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by guoting329 at 2011-07-18 20:57:59:
我也遇到同样的问题,连接转化重复了几遍就是做不出来,可师姐一做就出来了,也是极其的郁闷!!

呵呵 ,一起学习吧。
16楼2011-07-19 10:02:45
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maomao809920

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-07-18 12:45:06:
新手呀,没有做出来很正常的;慢慢来就可以很随意的;
PCR这个东西呢,首先你得先搞清楚原理是什么,就是体系中各个样品是干什么的,这个必须清楚,不要等做过很多PCR了,才发现里面什么东西是干什么的都不知道, ...

谢谢了先~

师哥也说这很正常,不过对于刚做实验的我,还是很桑心滴。郁闷了一晚上,这么初级的实验都做做不出,快怀疑我的智商了,嘎嘎。
17楼2011-07-19 10:05:45
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beautybanana

木虫 (著名写手)


西瓜(金币+1): 热心 2011-07-19 16:31:25
引用回帖:
Originally posted by maomao809920 at 2011-07-19 09:55:46:
不错!好好学习下,回头拿水练练。

加样时是不是最好打到管底,然后和其他样吸打混匀比较好啊?

打到管壁下部即可 使你打下的液体成为一个小点滴~ 每个样都这样加 最后短暂离心甩下液体即可
18楼2011-07-19 11:15:25
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

★ ★
西瓜(金币+2): 新虫交流,鼓励下 2011-07-21 11:07:57
感觉可能是因为你刚做生化,用枪加样时因为量小某一个关键成分根本就没加进去(加的时候一定要看着管底,确定哪些一两微升的加到液体里了),所以总没结构,慢慢来,细心就好
我会绕一个圈,走回到实验室
19楼2011-07-20 08:55:48
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boymin2010

金虫 (正式写手)

如果你的师兄电泳结果又引物二聚体而你的没有,可以肯定你没有加入引物啦。
20楼2011-07-20 09:52:34
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