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塞外雨

金虫 (著名写手)

[求助] 确定胶体金与标记蛋白用量之比时变色聚沉原因

(1)根据待标记蛋白的要求,将胶体金调好pH之后,分装10管,每管1ml。
  (2)将标记蛋白(以IgG为例)以0.005Mol/L pH9.0硼酸盐缓冲液做系列稀释为5µg/ml~50µg/ml,分别取1ml,加入上列金胶溶液中,混匀。对照管只加1ml稀释液。
  (3)5min后,在上述各管中加入0.1ml 10%NaCl溶液,混匀后静置2h,观察结果。
  (4)结果观察,对照管(未加蛋白质)和加入蛋白质的量不足以稳定胶体金的各管,均呈现出由红变蓝的聚沉现象;而加入蛋白量达到或超过最低稳定量的各管仍保持红色不变。
谢谢
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grandstone

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
塞外雨(金币+2): 2011-08-30 10:17:27
dhd997(金币+3): good 2011-08-30 18:50:50
wanhscn(金币+2, MolEPI+1): Good!根据楼主反馈!破格授予专家指数! 2011-12-27 16:15:23
主要是因为加入了NaCl,它和胶体金上的位点结合后会引起胶体金聚沉,不过如果你加入的蛋白量太少的话,不加入NaCl也会变蓝的,主要是因为胶体金溶液不稳定导致的
3楼2011-08-29 19:57:00
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塞外雨

金虫 (著名写手)

这问题太简单了吗?怎么没有回的
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
2楼2011-07-17 21:16:56
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塞外雨

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by grandstone at 2011-08-29 19:57:00:
主要是因为加入了NaCl,它和胶体金上的位点结合后会引起胶体金聚沉,不过如果你加入的蛋白量太少的话,不加入NaCl也会变蓝的,主要是因为胶体金溶液不稳定导致的

谢谢啊
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
4楼2011-08-30 10:18:01
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grandstone

铁虫 (小有名气)

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励经验交流 2011-08-31 07:44:29
不客气,胶体金这个东西快把我搞崩溃了,灵敏度提高太难了
5楼2011-08-30 21:03:31
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