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xiajing_acm新虫 (小有名气)
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[求助]
流式用来调整仪器参数的对照组细胞的制备问题
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各位大侠： 你们好！ 小弟在流式检测调整参数方面有几点疑问，请大家帮我解答一下，谢谢！ 1、每次流失检测是不是都必须要进行仪器参数，比如电压、补偿等的调节呢？不调节参数的话，对实验本身会有多大的影响呢？数据可以使用吗？ 2、用同类型的protocol，比如同为抗肿瘤的另一种药物诱导同一种细胞周期阻滞或者凋亡的protocol可以进行这种药物的检测吗？ 3、PI单染做周期检测时仪器的参数的调节需不需要单独使用对照组来进行呢？不需要的话是怎么调节的呢？ 4、Annexin V-PI等的双染或者多染的时候好像是需要未染任何一种染料的细胞作为阴性对照来调节电压，那么这个细胞应该是用没有加药的空白组细胞吧？用单染的细胞来调节补偿的时候应该用单染阳性的细胞呢还是也用未加药的空白组细胞呢？如果用单染阳性的细胞，那么这种细胞该怎么诱导产生呢？ 以上问题一直很困惑，请大家帮帮忙啦！非常感谢！ |
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【答案】应助回帖
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xiajing_acm(金币+2): 谢谢你，“没加药的空白细胞Annexin V单染和PI单染的调补偿”，这样的细胞敢确定一定有Annexin V和PI的信号吗？ 因为空白组细胞有凋亡和坏死的细胞有也不会很多啊！ 2011-07-16 23:20:58
qinhy(金币+1): 谢谢应助回帖~ 2011-07-17 09:27:42
xiajing_acm(金币+3): 2011-08-10 14:00:12
xiajing_acm(金币+2): 谢谢你，“没加药的空白细胞Annexin V单染和PI单染的调补偿”，这样的细胞敢确定一定有Annexin V和PI的信号吗？ 因为空白组细胞有凋亡和坏死的细胞有也不会很多啊！ 2011-07-16 23:20:58
qinhy(金币+1): 谢谢应助回帖~ 2011-07-17 09:27:42
xiajing_acm(金币+3): 2011-08-10 14:00:12
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1.可以每次调也可以直接调出以前做的模板测，但是不同的细胞参数设置不同 2.不明白什么意思 3.对照的处理方式也要跟加药组一样，用对照调好参数之后才能测加药组的 4.做凋亡的没加药的空白细胞要有四组：不处理的；Annexin V单染的；PI单染的；双染的，前三个是调参数的，没加药的空白细胞Annexin V单染和PI单染的调补偿。 |
2楼2011-07-16 16:34:45