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binlos

新虫 (初入文坛)

[求助] 非常棘手的问题——放线菌固体发酵老是被霉菌污染而没长放线菌

很是惭愧,放线菌固体发酵试验做了好几个月了,一直没有取得进展,老是霉菌污染而放线菌没长出来,尝试过很多途径,试过好几种固体基质,如:菜园土、细沙、麸皮、玉米粉、谷壳等,也尝试过两种基质的混合;试过不同初始含水量,试过延长灭菌时间(60min)、多次灭菌(2次),干热灭菌也试过;还有固体接种前液体培养基划线均未被污染。。。

请诸位帮忙下哈,非常感谢!(Email:binloslyb@163.com
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-11-30 11:12:46
60摄氏度灭菌效果不好的,可以用消毒液进行杀菌,如过氧乙酸、甲醛等,不只是培养箱,室内环境也要灭菌的。
固体培养基灭菌很难灭彻底的,蒸汽的穿透效果不好,灭菌的时候可以将培养基铺的薄一些,灭菌效果可能会好一些。
7楼2011-07-15 14:09:32
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
scelab(金币+2): 谢谢交流 2011-07-12 23:22:54
我怀疑是灭菌的问题,菜园土那么复杂就不说了,但是为什么细沙也灭不好?是不是温度不够高?是不是121-126度湿热灭菌?为什么用细沙呢?没营养的,不知道是不是有什么特别用途。麦麸也好灭菌的,怪了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-12 21:43:17
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-07-13 16:08:10
还是查一下你的培养环境吧,如果总是在染霉菌,培养环境中肯定会有大量的霉菌孢子,应该把环境彻底消毒后再做吧,如果环境处理不好,染菌的机率是非常大的。
3楼2011-07-13 11:29:21
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binlos

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by binlos at 2011-07-12 20:29:36:
很是惭愧,放线菌固体发酵试验做了好几个月了,一直没有取得进展,老是霉菌污染而放线菌没长出来,尝试过很多途径,试过好几种固体基质,如:菜园土、细沙、麸皮、玉米粉、谷壳等,也尝试过两种基质的混合;试过不 ...

灭菌是122摄氏度,60min,2次 都试过。。。。

用细沙是想和菜园土混合在一起,增加菜园土的疏松度,

麸皮培养基经常被黑曲霉或白色霉状物污染
4楼2011-07-13 20:37:55
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