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qing蓝qing

木虫 (小有名气)

[求助] 如何提高ELISA检测范围?

如何提高ELISA检测范围?达到一定量时,就饱和了再多就出现Hook效应了,这是什么原理或原因造成的那?在一定范围内提高包被量可以提高检测范围,但是还想提高的话,怎么办?求助!!
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zsy1106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
silicare(金币+4, EPI+1): 谢谢参与 2011-07-07 17:36:35
Hook对于传统的ELISA来讲很难去解决,现在是有一些新的方法,但是都还不是那么成熟,如何有效的在有限的板上提高包被量是问题的关键,我了解过的方法有:
1、管式化学发光:管式因为增大了可包被面积,其包被量相比传统的板式是要高很多的;但是不容易实现,因为涉及到新的检测仪器,而且仪器不便宜。不过管式化学发光在临床上的应用是很有前景的;
2、通过标记的方法实现放大:可利用不同的手段和“化学分子,将板上可包被的位置从一个平面延伸成为一个空间,换句话说就是借助一些分子如右旋糖酐等在板上撑起一个立体的支架,而包被原料可通过标记或吸附等方法附着在这个立体的支架上,而不是单单一个板底的平面,自然增大了包被量。做这方面的改变,要去看一点化学方面的书,或者一些专门介绍标记方法的资料,对于在这方面没有经验的初试身手的朋友来说,也不是件很容易的事情。
3楼2011-07-07 14:05:37
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yaojc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-06 19:59:31
qing蓝qing(金币+10): 2011-07-20 08:05:51
ELISA方法HOOK效应的产生在一步法中比较常见,两步法中HOOK效应浓度会很高。
检测范围的提高比较难,更换原料可能有效果。
关于HOOK效应产生的原因,推荐一篇文章,上网搜一下“试论HOOK效应的分子基础”,祝实验顺利。
专注、专心、专业
2楼2011-07-06 17:14:41
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