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gaojing198

铁虫 (初入文坛)

[求助] 非水毛细管电泳

我做的是非水毛细管电泳,缓冲溶液是tris+醋酸+乙氰+甲醇,但是基线老是不平稳,电流都是在4、5µA这个样子,出峰从来不能重现,而且杂峰很多,后来索性都不出峰了,测得是酚酸,希望得到高人指点。
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3106891

铜虫 (正式写手)

不出峰的原因很多,1.样品浓度是否太小 毛细管的内径很小,光程短,紫外检测灵明度低,建议样品浓度为1-10mM。2.检测窗口处的涂层是否除干净,毛细管外面的黄色涂层是不透紫外光的(可以用小刀刮掉或用打火机烧掉涂层)
4楼2011-07-22 16:04:29
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

【答案】应助回帖

gaojing198(金币+3): 有道理但没解决主要问题 2011-07-10 15:31:13
gaojing198(金币+2): 就是这样子 2011-07-14 10:31:15
非水CE本来就比较难做的,重现性差是其一大特点,尤其是选择buffer体系选择不好的时候。
楼主可以看看你的电流是否稳定,总体来说,如果你用的是50cm左右的capillary,内径如果是75um的话,4~5mA的电流说明的离子强度有些小,可能会引起重现性交差。
七窍通了六窍
2楼2011-07-06 20:31:18
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gaojing198

铁虫 (初入文坛)

电流还算比较稳定,就是比较低,试了不少体系都不出,谁能告诉我是怎么回事啊?
3楼2011-07-10 15:33:13
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3106891

铜虫 (正式写手)

3.电压的方向 通常情况下,毛细管内壁带负电荷,施加电压的方向为正向(normal),如果管壁带正电荷,施加电压的方向为反向(reverse)4.压力进样的方向为向前(forword)。5.分离电压不要太小,否则出峰时间太长,通常设为15kV。6.检查检测器的表面是否干净。
5楼2011-07-22 16:04:44
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