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lixuepu

金虫 (正式写手)

[求助] 量子点与抗体的偶联

最近在做一个量子点与羊抗猪的IgG的偶联,也就是我的二抗,分子量大概150KD,我加的NHS和EDC的比例一般是1.2:1,量子点是巯基丙酸修饰的,量子点和EDC比例大概1:1000,一般先加EDC,NHS活化量子点半小时,再加1.2倍的IgG但是每次练完之后连上蛋白的量子点很少,用100KD的超滤管超滤后量子点位置几乎都没有荧光了,做了几次后面的免疫,效果都很差,比如EDC和NHS,我也换了其他的比例,但是效果都很差,我之前用BSA做完之后,做电泳效果还好…… 但是这个IgG总是连不上,跪求高人指导啊………………
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奋斗就有希望。
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嗑书的虫儿

银虫 (初入文坛)

请教一下,为何Ab和Qds比例要5-10:1 这样不会有很多未标记抗体吗? 我看实际Qds和抗体连接的是接近一比一的 为何抗体要投过量这么多呢?
21楼2021-08-25 10:26:29
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