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木虫 (小有名气)

银虫

[交流] 全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用无菌注射用水代替? 已有4人参与

全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用无菌注射用水代替?
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银虫
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


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楼上两位大神已经证明,无菌注射用水能保证纯度和无菌,我就说下TE buffer吧。

TE buffer的成分就是Tris和EDTA。Tris是一种常用的pH缓冲液;EDTA可以螯合阳离子,如二价镁离子,而镁离子是很多酶活性所必需的(如DNA酶),所以EDTA可以抑制DNA酶的活性。


我不知道全血DNA提取的具体步骤如何,所以能不能用无菌水代替,还要看TE在里面起什么作用。
TE无非就是提供一个特定的pH环境(可用HCl调节pH),以及抑制核酸酶的活性。如果用来悬浮样品,或者最后提完后溶解DNA,那完全可以用无菌水代替。就像见裂解法提质粒时的溶液1,成分是葡萄糖+tris+EDTA,作用无非就是把菌体悬浮起来,完全可以用水代替。提完质粒后,最后加TE溶解DNA,这一步也可以用水代替,不过TE的弱碱性环境更适于DNA的长期保存。

当然,如果需要特殊的pH,或者实验要求很严格,那就不能用水代替了。

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12楼2011-07-03 19:19:44
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gwbk

木虫 (正式写手)

★ ★
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1949stone(金币+1): 似的 哇哈哈 2011-07-02 22:33:37
不可以,注射用水虽然是无菌的,但是一般都是葡萄糖溶液或者生理盐水,对保存或者是后续试验有不可知的影响。。。可以用哇哈哈瓶装纯净水灭菌代替,哇哈哈。
2楼2011-07-02 21:52:36
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cdl007

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励 2011-07-03 10:17:00
当然可以用注射用水了,注射用水都是蒸馏水好不好。。。。就是小玻璃瓶的,护士用镊子一敲就开的,
3楼2011-07-02 22:39:39
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gwbk

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+3): good 2011-07-03 10:17:16
护士一敲就开的是安瓿管,一般安瓿管都是装安瓿水针剂的。很多,比如庆大霉素针剂、青霉素针剂。

中国药典2010版没有规定灭菌注射用水的性质,不管是离子交换、反渗透、双蒸水,符合如下标准即可:
【检查】 pH值 取本品100ml,加饱和氯化钾溶液0.3ml,依法测定(附录Ⅵ H),pH值应为5.0~7.0。
氨 取本品50ml,加碱性碘化汞钾溶液2ml,放置15分钟,如显色,与标准氯化铵溶液(取氯化铵31.5mg,加无氨水适量使溶解并稀释至1000ml)1.0ml,加无氨水48ml与碱性碘化汞钾溶液2ml制成的对照液比较,不得更深(0.000 02%)。
重金属 照纯化水项下的方法检查,应符合规定。 
[增订]
【检查】电导率 应符合规定(附录)。
总有机碳、铝盐 照纯化水项下的方法检查,应符合规定。

都是一些常规的检测,纯度未必好。
而注射用水,一般会标注,XXX用水,原因不说了。如果未标,则应符合药典规定。

建议:不推荐使用注射用水。
4楼2011-07-03 00:39:05
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