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全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用无菌注射用水代替？ 已有4人参与
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| 全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用无菌注射用水代替？ |
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西瓜
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楼上两位大神已经证明，无菌注射用水能保证纯度和无菌，我就说下TE buffer吧。 TE buffer的成分就是Tris和EDTA。Tris是一种常用的pH缓冲液；EDTA可以螯合阳离子，如二价镁离子，而镁离子是很多酶活性所必需的（如DNA酶），所以EDTA可以抑制DNA酶的活性。 我不知道全血DNA提取的具体步骤如何，所以能不能用无菌水代替，还要看TE在里面起什么作用。 TE无非就是提供一个特定的pH环境（可用HCl调节pH），以及抑制核酸酶的活性。如果用来悬浮样品，或者最后提完后溶解DNA，那完全可以用无菌水代替。就像见裂解法提质粒时的溶液1，成分是葡萄糖+tris+EDTA，作用无非就是把菌体悬浮起来，完全可以用水代替。提完质粒后，最后加TE溶解DNA，这一步也可以用水代替，不过TE的弱碱性环境更适于DNA的长期保存。 当然，如果需要特殊的pH，或者实验要求很严格，那就不能用水代替了。 |
12楼2011-07-03 19:19:44
gwbk
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2楼2011-07-02 21:52:36
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3楼2011-07-02 22:39:39
gwbk
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dhd997(金币+3): good 2011-07-03 10:17:16
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dhd997(金币+3): good 2011-07-03 10:17:16
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护士一敲就开的是安瓿管，一般安瓿管都是装安瓿水针剂的。很多，比如庆大霉素针剂、青霉素针剂。 中国药典2010版没有规定灭菌注射用水的性质，不管是离子交换、反渗透、双蒸水，符合如下标准即可： 【检查】 pH值 取本品100ml，加饱和氯化钾溶液0.3ml，依法测定（附录Ⅵ H），pH值应为5.0～7.0。 氨 取本品50ml，加碱性碘化汞钾溶液2ml，放置15分钟，如显色，与标准氯化铵溶液(取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释至1000ml)1.0ml，加无氨水48ml与碱性碘化汞钾溶液2ml制成的对照液比较，不得更深(0.000 02%)。 重金属 照纯化水项下的方法检查，应符合规定。 [增订] 【检查】电导率 应符合规定（附录）。 总有机碳、铝盐 照纯化水项下的方法检查，应符合规定。 都是一些常规的检测，纯度未必好。 而注射用水，一般会标注，XXX用水，原因不说了。如果未标，则应符合药典规定。 建议：不推荐使用注射用水。 |
4楼2011-07-03 00:39:05
