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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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完美人生3062

金虫 (初入文坛)

博士

[求助] 向各位大神请教一个简单的问题,希望大牛不吝赐教

假设,在工作中,偶然发现一种蛋白,这种蛋白免疫性很好,但是我不知道这个蛋白的序列,也不知道这个蛋白的名称,现在我想知道用什么方式才能知道这个蛋白的名称或者序列,并用什么方式才能反推出这个蛋白对应的基因序列,并利用这个序列设计引物,进而克隆,扩增,之后转到质粒,扩增蛋白,希望能有人帮我详细的讲解一下
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-06-30 18:45:22
完美人生3062(金币+1): 谢谢你的赐教,受用了 2011-07-07 09:54:43
首先,即使知道蛋白序列也是推不出基因序列的,氨基酸和核苷酸之间是一对多的关系,因为一个氨基酸有多个密码子可以编码。
根据你蛋白的性质查文献,看看有没有人报道过相关蛋白,从而得到一些信息。
如果查不到相关信息,但你说的东西基本可以做,基本过程如下:先纯化出该蛋白,然后进行蛋白质N端测序和肽谱图分析,根据这些信息设计兼并引物,扩增出部分基因片段,然后RACE获得全长基因(如果能N端测序和C端测序都进行最好,就可以设计引物获得全长基因)。
2楼2011-06-30 09:39:36
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