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[求助]
向各位大神请教一个简单的问题，希望大牛不吝赐教
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| 假设，在工作中，偶然发现一种蛋白，这种蛋白免疫性很好，但是我不知道这个蛋白的序列，也不知道这个蛋白的名称，现在我想知道用什么方式才能知道这个蛋白的名称或者序列，并用什么方式才能反推出这个蛋白对应的基因序列，并利用这个序列设计引物，进而克隆，扩增，之后转到质粒，扩增蛋白，希望能有人帮我详细的讲解一下 |
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 【分子生物】EPI帖 |
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lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-06-30 18:45:22
完美人生3062(金币+1): 谢谢你的赐教，受用了 2011-07-07 09:54:43
dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-06-30 18:45:22
完美人生3062(金币+1): 谢谢你的赐教，受用了 2011-07-07 09:54:43
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首先，即使知道蛋白序列也是推不出基因序列的，氨基酸和核苷酸之间是一对多的关系，因为一个氨基酸有多个密码子可以编码。 根据你蛋白的性质查文献，看看有没有人报道过相关蛋白，从而得到一些信息。 如果查不到相关信息，但你说的东西基本可以做，基本过程如下：先纯化出该蛋白，然后进行蛋白质N端测序和肽谱图分析，根据这些信息设计兼并引物，扩增出部分基因片段，然后RACE获得全长基因（如果能N端测序和C端测序都进行最好，就可以设计引物获得全长基因）。 |
2楼2011-06-30 09:39:36