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western和PCR选择问题
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| 做细胞凋亡的实验，想测定caspase-3,9蛋白，想问下是用半定量PCR还是western对其进行测定比较好？是不是都是说明凋亡问题，哪个更好一点，还是其中一个用PCR另一个用western？请详细说明一下二者的区别，测定后分别能说明的问题！新手请教高手帮忙！！ |
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 【分子生物】EPI帖 |
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cdl007
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-06-30 07:42:45
瘪(金币+2): 2011-06-30 19:18:32
dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-06-30 07:42:45
瘪(金币+2): 2011-06-30 19:18:32
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Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。 一般检测凋亡要有pro-caspase3（32KD）减少的趋势，活化caspase3（17KD）增加的趋势。这是指western PCR 需要做一下的，但是结果不一定和western的一致。因为caspase的变化主要是蛋白的活化。 caspase9 买相应抗体即可 |
2楼2011-06-30 06:57:30