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喇叭

新虫 (初入文坛)

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[求助] 丝状真菌基因组提取

各位经验人士：
我是做丝状真菌方面的分子实验，但是我所提取的基因组一般浓度都很低，但也不知道是什么方面的原因，完全是按试剂盒的步骤来的，因为接下来要做southern blot ，但是所提取的基因组浓度又很低，电泳的时候只有很淡的一条带，酶切电泳结果什么也没有，所以很着急，因为在基因组方面实在是有缺陷，跪求大家的帮助，谢谢各位了

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1楼2011-06-29 14:28:28

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beautybanana

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

Originally posted by 喇叭 at 2011-06-29 14:28:28:
各位经验人士：
我是做丝状真菌方面的分子实验，但是我所提取的基因组一般浓度都很低，但也不知道是什么方面的原因，完全是按试剂盒的步骤来的，因为接下来要做southern blot ，但是所提取的基因组浓度又很低 ...

从固体斜面上获得的菌丝可能量不是够多，可以把菌丝放在液体培养基里扩大培养，这样取得的提取基因组的原材料就够多了，然后把培养物离心收集，可以稍稍烘干或用其他方法弄干，尽量少含液体水份，取足够的量如0.5g培养物，用液氮研磨，剩下的就可以用CTAB法去提取了，（做杂交的模板不要吹的太干了，可以先酶切看看能不能切的很好），浓度低可能是菌丝太少，研磨研磨就没有了或是菌丝太湿水分过多等原因吧~