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RNA的测量方法
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求教: 我这里遇见一点问题,是关于RNA的定量分析的,我查了一些文献说可以用紫外分光光度计,但是均未指明其参照试剂是什么,这里求教一下有谁用过该方法的,请给予指导.................十分感谢Sample TextSample TextSample Text |
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2楼2006-10-18 17:47:09
ajian1982
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3楼2006-10-18 18:20:29
windfall_0304
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4楼2006-10-18 18:39:03
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根本行不通!!! 紫外分光光度计只能用来粗粗测定DNA的量 常用的mRNA定量方法有四种:northern杂交,原位杂交,RNAse保护分析,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)。还有一种方法为cDNA阵列分析,但由于价格昂贵,使用受到很大的局限。 Northern分析是唯一能够提供mRNA大小、RNA样品的完整性和剪接方式改变等信息的方法。 原位杂交是最复杂的方法,也是能够对组织细胞进行定位分析的唯一方法。RNAse保护分析可定位转录的起点和终点,以及内含子和外显子的边界,可对大小相似的mRNA分子进行区分(因为其在northern杂交中的迁移位置相似)。 以上三种方法的缺点是敏感性相对较低。 RT-PCR方法是目前检测基因表达方式和比较不同样品中mRNA表达水平最常用的方法,敏感,快速,重复性和稳定性也很好,可以进行半定量检测(主要是内参照竞争法)和定量检测。现在比较热门的是实时定量RT-PCR(real-time RT-PCR),或对mRNA进行相对或绝对定量。 |
5楼2007-03-06 23:12:31
6楼2007-03-06 23:14:04













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