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RNA的测量方法
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求教： 我这里遇见一点问题，是关于RNA的定量分析的，我查了一些文献说可以用紫外分光光度计，但是均未指明其参照试剂是什么，这里求教一下有谁用过该方法的，请给予指导.................十分感谢Sample TextSample TextSample Text |
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根本行不通！！！ 紫外分光光度计只能用来粗粗测定DNA的量 常用的mRNA定量方法有四种：northern杂交，原位杂交，RNAse保护分析，反转录聚合酶链反应（RT－PCR）。还有一种方法为cDNA阵列分析，但由于价格昂贵，使用受到很大的局限。 Northern分析是唯一能够提供mRNA大小、RNA样品的完整性和剪接方式改变等信息的方法。 原位杂交是最复杂的方法，也是能够对组织细胞进行定位分析的唯一方法。RNAse保护分析可定位转录的起点和终点，以及内含子和外显子的边界，可对大小相似的mRNA分子进行区分（因为其在northern杂交中的迁移位置相似）。 以上三种方法的缺点是敏感性相对较低。 RT－PCR方法是目前检测基因表达方式和比较不同样品中mRNA表达水平最常用的方法，敏感，快速，重复性和稳定性也很好，可以进行半定量检测（主要是内参照竞争法）和定量检测。现在比较热门的是实时定量RT-PCR（real-time RT-PCR)，或对mRNA进行相对或绝对定量。 |
5楼2007-03-06 23:12:31
2楼2006-10-18 17:47:09
ajian1982
金虫 (小有名气)
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3楼2006-10-18 18:20:29
windfall_0304
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4楼2006-10-18 18:39:03