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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告

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qq侠客

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 5RACE纠结中...

一直在用RACE方法克隆基因，5RACE一直做不出来，不是没条带就是测序之后拼接不上，不知道是不是5RACE模板的问题？大家遇到过这种问题吗？5RACE模板用的事TaRaka公司的试剂盒

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1楼 2011-06-22 23:00:18

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dayulee

木虫 (正式写手)

愚木虫

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能扩增出条带，但拼接不上是什么意思？首先扩增出来的序列是不是你需要的序列，如果是的话，那应该是引物你是不是设计的问题？如果不是你的目的序列，拼接不上肯定是正常的了。我也在做race，也是在摸索中，有的时候扩出来的序列不是目的序列。我觉得在保证模版质量的前提下，引物最关键了。

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好好学习，天天向上

7楼2012-07-26 16:17:47

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vickystt

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 欢迎交流 2011-06-23 15:00:09
qq侠客(金币+2): 2011-06-25 13:20:03

重新设计引物可能是你引物特异性不够高

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2楼2011-06-22 23:02:45

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qq侠客

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引物设计好几次了，跑出来有条带，有时还比较单一，测序之后也能找到引物就是拼接不上

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3楼2011-06-22 23:20:21

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qq侠客

铜虫 (初入文坛)

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引用回帖:

Originally posted by vickystt at 2011-06-22 23:02:45:
重新设计引物可能是你引物特异性不够高

跑出来条带单一，但是测序之后就是拼接不上，不知道是否是5RACE模板的问题？

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4楼2011-06-22 23:22:05

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