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新虫 (初入文坛)

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[求助] 原生质体再生

最近小弟在做链霉菌的原生质体转化，但是原生质体做好后在板上，总是不怎么长，
请问：原生质体的再生和哪些因素有关阿？最关键的因素是什么阿？

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1楼 2011-06-18 15:30:24

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icz

金虫 (小有名气)

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性别: GG
专业: 微生物遗传育种学

原生质体不长有两个原因：
1、原生质体已死，可能是渗透压不够破裂、涂布破裂或者转化电压太高电击死了，我一般不涂布的，加入软琼脂培养基后倾倒摊匀即可；
2、细胞壁破损太严重，无法再生。考虑调整原生质体制备条件。
至于培养条件，一般不会出现不长的情况，只是长得好坏。另外，确保培养基中没有添加抑制你培养微生物的抑制剂。
建议：针对以上几种情况，仔细检查试验设计，稀释过程中是否有渗透压太低情况。