24小时热门版块排行榜    

查看: 1716  |  回复: 10

1035110

新虫 (初入文坛)

[求助] 原生质体再生

最近小弟在做链霉菌的原生质体转化,但是原生质体做好后在板上,总是不怎么长,
请问:原生质体的再生和哪些因素有关阿?最关键的因素是什么阿?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

1035110(金币+1): 2011-06-19 10:19:31
渗透压保护剂加了吗?
2楼2011-06-18 15:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1035110

新虫 (初入文坛)

加了,加的蔗糖,但最后就是不长,不知道是不是最后那个再生板有问题。我用的R2YE板
3楼2011-06-19 10:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 克隆大虾 at 2011-06-18 08:34:18:
渗透压保护剂加了吗?

可以试试MS或者SFM培养基,渗透压1M山梨醇试试
4楼2011-06-19 21:47:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1035110

新虫 (初入文坛)

之前做的时候,R2YE 加了磷酸二氢钾,氯化钙,脯氨酸和氢氧化钠

这些东西在原生质体再生过程中都起什么作用啊,请教!
5楼2011-06-19 22:51:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1035110

新虫 (初入文坛)

氢氧化钠是不是很关键?也就是说,PH对原生质体再生是不是很关键?
6楼2011-06-19 22:52:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1035110

新虫 (初入文坛)

涂板的时候有没有什么特别的讲究?涂布棒会不会把菌涂死?
7楼2011-06-19 22:54:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

plumplumgxc

金虫 (正式写手)

原生质体都死了吧
科研这条道不好走啊。。。
8楼2011-06-21 10:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

icz

金虫 (小有名气)

原生质体不长有两个原因:
1、原生质体已死,可能是渗透压不够破裂、涂布破裂或者转化电压太高电击死了,我一般不涂布的,加入软琼脂培养基后倾倒摊匀即可;
2、细胞壁破损太严重,无法再生。考虑调整 原生质体制备条件。
至于培养条件,一般不会出现不长的情况,只是长得好坏。另外,确保培养基中没有添加抑制你培养微生物的抑制剂。
建议:针对以上几种情况,仔细检查试验设计,稀释过程中是否有渗透压太低情况。
今生的追求大于我的生命!
9楼2011-06-21 13:41:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1035110

新虫 (初入文坛)

嗯,明白了,谢谢啊,可能是我溶菌酶处理时间过长了
10楼2011-06-21 17:51:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1035110 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今年也是没消息就是没中么 +3 vito刘 2026-06-13 3/150 2026-06-14 06:40 by zzahkj
[基金申请] 函评 +3 布布和一二 2026-06-13 3/150 2026-06-13 23:35 by 芋圆香飘飘
[找工作] 售SCI文章,我:8.O.5.51O.5.4,科目齐全,可十急 +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 3/150 2026-06-13 19:07 by 1js5n6upxm
[公派出国] +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 19:05 by 1js5n6upxm
[公派出国] T^T +5 q1zg6x4lf3 2026-06-12 5/250 2026-06-13 18:53 by lkmi35jdzt
[公派出国] π_π +4 m584r2z4j3 2026-06-11 4/200 2026-06-13 18:33 by lkmi35jdzt
[考博] π_π +4 m584r2z4j3 2026-06-11 4/200 2026-06-13 18:25 by lkmi35jdzt
[考研] o>_<o +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-13 18:22 by lkmi35jdzt
[考博] T^T +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 3/150 2026-06-13 14:45 by 80j16ujcu8
[考研] O(∩_∩)O +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 14:42 by 80j16ujcu8
[考博] T^T +4 jk31rb6vyz 2026-06-12 4/200 2026-06-13 12:09 by 80j16ujcu8
[找工作] 售SCI文章,我:8.O.5.51O.5.4,科目齐全,可十急 +4 q1zg6x4lf3 2026-06-12 4/200 2026-06-13 08:53 by t4hz8376wy
[考博] →_→ +3 q1zg6x4lf3 2026-06-12 3/150 2026-06-13 08:49 by t4hz8376wy
[论文投稿] →_→ +5 m584r2z4j3 2026-06-11 5/250 2026-06-13 08:13 by t4hz8376wy
[基金申请] 面上项目没有好文章就没希望了吗? +19 1234567wang 2026-06-07 21/1050 2026-06-12 21:24 by littlezl
[教师之家] 重庆理工大学副校长遇刺身亡 传涉案副教授疑因积怨行凶 +6 yexuqing 2026-06-07 7/350 2026-06-12 16:46 by wwwkkk83
[基金申请] 前几天时间戳更新了 +8 vito刘 2026-06-11 13/650 2026-06-12 14:17 by BlakeReary
[教师之家] AASSDDFF +3 m584r2z4j3 2026-06-11 3/150 2026-06-12 11:28 by zs48m4lz8g
[考博] 还有课题组有博士名额吗 +5 冻雨天 2026-06-07 6/300 2026-06-08 20:59 by RCS_tyro
[考博] 博士申请 +3 张城斐 2026-06-07 3/150 2026-06-08 09:15 by A大朋同学
信息提示
请填处理意见