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[交流]
纯化酶的过程中如何达到4度的要求
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如题,本人从事酶纯化已经有4年,纯化的酶也有差不多10个吧,有的酶对温度不敏感,中间所有的过程就不用考虑温度这个因素,有的酶很敏感,如果不低温,就很容易失活,纯化到最后得到的酶量很少了。 文献上在提到大部分酶的纯化时,都会提到,在4度进行,但这个条件很难达到,特别是大批量纯化时,耗时长,步骤多,量多,即中试纯化酶如何达到低温的要求啊? 以前在实验室有看到采用层析柜,还有专门的冷室,自己也有将室内空调温度打低的做法,当然该方法不科学,实验重复性也不好。 故请教各位虫虫,你们纯化酶时都是怎样做的?或者你们周围都采用怎样的方法控制低温? 或者可否定做大一点点层析柜,将所需的东西都放到里面,人在外面观察?整个冷室是不是电脑放进去也可以? 思路还是比较乱,请大家多给些建议,谢谢了 |
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6楼2011-06-19 16:37:53
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看天(金币+2): 2011-06-19 17:37:25
paulajjh(金币+5): 柱体积有多大?处理量有多大?可否进一步说明,谢谢。另外层析柜可否定做 2011-06-20 10:59:32
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看天(金币+2): 2011-06-19 17:37:25
paulajjh(金币+5): 柱体积有多大?处理量有多大?可否进一步说明,谢谢。另外层析柜可否定做 2011-06-20 10:59:32
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我没有做过,但是见过我们实验室的人做过。样品是在层析柜里面,那个层析柜体积很大,高约等于2.5M,宽1-2米,里面确实是放着阿卡塔自动纯化系统(4度环境),人不用进去,控制他的电脑放在层析柜的外面。人隔着玻璃能看到里面的东西,具体数据。出峰时间有电脑来检测,记录。 [ Last edited by Poincare2010 on 2011-6-19 at 15:17 ] |
2楼2011-06-19 15:15:17
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
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专家经验: +248 - BioEPI: 73
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19558.9
- 帖子: 6605
- 在线: 2785.3小时
- 虫号: 856414
3楼2011-06-19 15:33:53
7楼2011-06-20 21:44:49
简单回复
2011-06-19 15:47
回复
祝福












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