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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 纯化酶的过程中如何达到4度的要求
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paulajjh

木虫 (著名写手)

[交流] 纯化酶的过程中如何达到4度的要求

如题，本人从事酶纯化已经有4年，纯化的酶也有差不多10个吧，有的酶对温度不敏感，中间所有的过程就不用考虑温度这个因素，有的酶很敏感，如果不低温，就很容易失活，纯化到最后得到的酶量很少了。
文献上在提到大部分酶的纯化时，都会提到，在4度进行，但这个条件很难达到，特别是大批量纯化时，耗时长，步骤多，量多，即中试纯化酶如何达到低温的要求啊？
以前在实验室有看到采用层析柜，还有专门的冷室，自己也有将室内空调温度打低的做法，当然该方法不科学，实验重复性也不好。
故请教各位虫虫，你们纯化酶时都是怎样做的？或者你们周围都采用怎样的方法控制低温？
或者可否定做大一点点层析柜，将所需的东西都放到里面，人在外面观察？整个冷室是不是电脑放进去也可以？
思路还是比较乱，请大家多给些建议，谢谢了
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1楼 2011-06-18 12:28:55
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
paulajjh(金币+1): 没有纯化过，但是想跟你确认下，你的淀粉酶酶活测定方法是怎样的？这个酶需要很多离子激活剂的，底物你采用的什么，可给我发站内消息沟通 2011-06-20 11:01:07
楼主有没有纯化过淀粉酶？


有没有试过明明能耐受某个pH值和氯化钠的，但是一挂柱交换之后就测不出活力了？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-06-19 15:33:53
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