| 查看: 5708 | 回复: 19 | |||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
Juliana芷蕊金虫 (小有名气)
|
[求助]
紫外分光光度法测的吸光值怎么转化为酶反应初速度呢？
|
||
|
如题，我是用紫外光度法中的动力学测木素过氧化物酶（Lip）的酶活， （测定方法： 取0.6 mL待测酶液，同时加入0.6 mL的10 mmol/L藜芦醇溶液，1.8 mL的酒石酸缓冲液（pH=3.0） 250 mmol/L，用0.03 mL，40 mmol/L的H2O2启动反应，总体积3.0 mL，25 ℃反应3 min，在310 nm（ε310=9300 mol-1cm-1）波长下测定吸光度的变化。同反应体系做空白样为不加入H2O2启动反应。一个酶活力单位（U）定义为每分钟氧化藜芦醇产生1 μmol藜芦醛所需的酶量。） 问题是我测的曲线吸光度变化不大，而且各段的斜率不一，这样在计算酶活时选线性部分我就很困惑，不知道怎么选点比较好，平行样之间的平行性也不好，还有就是通过吸光度变化怎么转化成反应初速度呢？我做的是酶催化动力学，做动力学对条件要求是不是很苛刻呢？现在濒临崩溃，忠心希望各位师长能给些提点，小妹不胜感激。 |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有123人回复
-
今天基金会出结果吗？20260819
已经有13人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有16人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有13人回复
-
为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？
已经有5人回复
-
今天放榜没戏了吧
已经有5人回复
-
今天放榜吗？
已经有15人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有12人回复
-
2027广东省杰青
已经有10人回复
-
朋友圈看到的
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 在线等,用紫外分光光度计测吸光度的问题
已经有23人回复
- 不同的紫外分光光度计是不是测出的吸收值不一样？
已经有11人回复
- 小分子蛋白测紫外吸光值
已经有8人回复
- 紫外分光光度法测蛋白酶活
已经有19人回复
- 过硫酸钾氧化-紫外分光光度法测总氮 吸光度高的很
已经有7人回复
- 【求助】用碘-碘化钾溶液比色法，使用紫外可见分光光度计测定吸光度
已经有5人回复
- 【求助】紫外分光光度法测硝酸盐氮的问题，吸光度全是负，负的情况下也能达到3个9。
已经有23人回复
- 【求助/交流】细菌中酶活的测定用紫外可见分光光度法怎么测？
已经有4人回复
- 【求助】为什么紫外测氨氮时空白样的吸光度值大于含氨氮的样品
已经有16人回复
- 【讨论】碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定水样中总氮
已经有43人回复
- 【求助】关于DNS测定还原糖，进行测吸光值的问题，请教高人指教，非诚勿扰！
已经有9人回复
zhang8826857: 编辑内容 2012-08-10 16:41
 [ Last edited by zhang8826857 on 2012-8-10 at 16:41 ] |
9楼2012-08-10 16:36:30
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
wolfebst(金币+5, EPI+1): 鼓励一下 2011-06-16 23:13:45
Juliana芷蕊(金币+3): 我主要想问的是紫外分光光度法测的吸光值怎么转化为酶（Lip）反应初速度，主要想知道转化公式呢，还是谢谢你呢 2011-06-17 08:49:35
wolfebst(金币+5, EPI+1): 鼓励一下 2011-06-16 23:13:45
Juliana芷蕊(金币+3): 我主要想问的是紫外分光光度法测的吸光值怎么转化为酶（Lip）反应初速度，主要想知道转化公式呢，还是谢谢你呢 2011-06-17 08:49:35
|
你得先确认你的酶有没有活性 如果有活性的话，理论上是可以测定酶活的 1.动力学的测量数据好坏取决于你的底物浓度和酶的浓度，酶多了反应太快来不及检测。应该将酶液稀释，蛋白量可以用BRADFORD法测定，就我感觉600微升的酶液量挺大的了~ 2.测量的线性范围至少应该是2min,结果才会比较可信。取得时候都是取初始的一段时间，要保证反应速率恒定 |
2楼2011-06-16 23:01:05
3楼2011-06-17 09:02:41
4楼2011-06-17 16:41:51
