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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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啮风

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
wickhamhan(金币+3): 2011-06-16 14:18:46
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-06-16 15:00:53
已知全基因组序列,上有一个调控基因,请问如何确定它的启动子
+++++++++++++++++++++++因为楼主的专业上面写的是微生物生理类,所以我仅以简单的原核生物为例来回答这个问题。
正如三楼回答的,有许多网站可以预测原核生物的启动子区,注意是区,里面包含了,启动子区的核心要素:-35,-10, 转录起始为点。但是这是经验预测,那么如果你要发文章确认这一段DNA序列,那么你首先确认转录起始位点,一般是引物延伸分析(primer extension analysis),这个位点确认好后,然后再结合生物信息学预测,上推10个,35个BP,一般就OK了。当然,还有一种就是我只要这一段,我不需要具体的位点信息,那么一般是在这个基因的上游,分别取ATG上游100BP, 101-200BP等等,然后将这些片断分别连接到无LAC启动子区的LACZ基因上游(这个LACZ基因是没有本身启动子的,基因的表达就要依赖你连接片断启动子活性的有无),然后通过IPTG诱导,测量半乳糖苷酶的活性来找到这个启动子区。
4楼2011-06-16 13:14:59
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