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lhwen182金虫 (正式写手)
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[求助]
DGGE进样
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| 请教各位高手，跑DGGE时是不是一定要将PCR产物浓缩到一定体积？我50微升体系P完后跑胶时经常会有一条贯穿整个胶面的横带，这个是不是进样量过大导致飘带引起的？ |
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4楼2011-06-14 18:36:04
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【答案】应助回帖
lhwen182(金币+4): 2011-07-11 21:42:14
| 错了, 一般DGGE的条带长度400 bp左右, 而primer-dimer长度也可以达到100 bp左右, 如果你的DGGE梯度和电泳的时间不是足够, primer-dimer是还在胶里面的, 而且一般做实验为了保险起见, 一般是不会跑得太久的, 很有可能在最底部就是primer-dimer. 我的建议一定要纯化, 这样就保证你的DGGE没有问题. 现在有很多的纯化试剂盒可用，生工的， takara的， 都很好用的， 如果你有真空浓缩系统， 也可以用PEG8000沉淀后，离心浓缩，干燥也可以把primer-dimer去掉，而且可以浓缩你的PCR产物 |
5楼2011-06-16 09:23:36
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