应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DGGE进样
51/1返回列表
查看: 892  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lhwen182

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE进样

请教各位高手，跑DGGE时是不是一定要将PCR产物浓缩到一定体积？我50微升体系P完后跑胶时经常会有一条贯穿整个胶面的横带，这个是不是进样量过大导致飘带引起的？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-06-14 16:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwen182

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by caihy119 at 2011-06-16 09:23:36:
错了, 一般DGGE的条带长度400 bp左右, 而primer-dimer长度也可以达到100 bp左右, 如果你的DGGE梯度和电泳的时间不是足够, primer-dimer是还在胶里面的, 而且一般做实验为了保险起见, 一般是不会跑得太久的, 很有可 ...

恩，谢谢你的建议。我再优化一下再做做看
赞一下 回复此楼
6楼2011-06-17 15:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

caihy119

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3): 谢谢分享 2011-06-14 17:26:29
lhwen182(金币+2): 谢谢 2011-06-14 18:36:59
lhwen182(金币+2): 2011-06-15 20:20:59
反正我从来没有浓缩过, 跑得也挺好的. 我建议还是不要浓缩的好! PCR跑35个循环浓度已经很高了, 为什么还要浓缩呢?不过P后, 还是需要对产物纯化, 去掉引物二聚体还是很有必要的
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-06-14 16:30:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小嫩瓜

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by caihy119 at 2011-06-14 16:30:00:
反正我从来没有浓缩过, 跑得也挺好的. 我建议还是不要浓缩的好! PCR跑35个循环浓度已经很高了, 为什么还要浓缩呢?不过P后, 还是需要对产物纯化, 去掉引物二聚体还是很有必要的

貌似是窜孔了吧，应该是样品跑出来了
赞一下 回复此楼
活的艰辛是因为执着和不放弃
3楼2011-06-14 17:26:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwen182

金虫 (正式写手)
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-06-14 18:54:03
引用回帖:
Originally posted by caihy119 at 2011-06-14 16:30:00:
反正我从来没有浓缩过, 跑得也挺好的. 我建议还是不要浓缩的好! PCR跑35个循环浓度已经很高了, 为什么还要浓缩呢?不过P后, 还是需要对产物纯化, 去掉引物二聚体还是很有必要的

你的纯化是怎么做的啊？好像我问的几个老师都没怎么做纯化，他只是将产物真空浓缩后就跑了。再说引物二聚体不是很小么，跑胶时不是会跑出去的么？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-06-14 18:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭