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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » Agilent1200片芯堵
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泉泽水

铜虫 (初入文坛)

[求助] Agilent1200片芯堵

本人现在用的是Agilent1200，最近呢，很奇怪，老是在做完实验后，要换上30%乙腈水冲柱子，在排水时，压力会很高很高。我用的流动相时0.025mol/l的磷酸二氢钾（用氢氧化钠调pH至6.0）与乙腈走梯度。走一天样之后冲柱子时就会堵，把白色的片芯拿出来超声或者换个新的就好啦，很郁闷，所以想问问大家是什么原因。盐浓度，我试过用0.01mol/ml的浓度也是堵。请大家帮帮忙，要是遇到有类似的经验的话，请提点提点，谢谢。
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学习，做自己。
1楼 2011-06-14 00:06:27
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韩柳

金虫 (小有名气)

超级金虫

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 3Q 2011-06-14 18:49:08
可以用20%的乙醇冲柱子，或者用纯水，我们实验室都这样冲柱子的。
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交论坛可交之人
2楼2011-06-14 02:22:33
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢！ 2011-06-14 12:34:00
冲柱时试试调低一点乙腈的比例，用90%水看看，但不要用纯水，不是所有色谱柱都能耐纯水。
堵的原因，大多是有机相比例高致使缓冲液中的盐析出。
另外，降低缓冲液中盐含量，会影响分析么？用0.01M~0.02M试试看，若有标准已规定用0.025M，那就算了。
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守候在风中的宁静。
3楼2011-06-14 08:23:27
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zhihua0207

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢！ 2011-06-14 12:34:11
楼主冲柱为什么不用5%甲醇-水呢，因为你溶液中含盐量比较高，而且还用的磷酸二氢钾，这玩意儿太毁柱子了，而且堵泵芯（就是你说的片芯吧，呵呵  我们都这么叫）也是常事，你配流动相的话现用现抽滤，我们一般5、6天才换一次，一般超声的话堵得轻的还行，最好找老师要新的，呵呵
冲柱尽量用含水量较高的有机相冲（水相大于95%），免得盐析出来，还有就是一定要接预柱（保护柱），定期冲系统和旁路
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立志改变，勇于超越
4楼2011-06-14 08:28:22
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shenchen920

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

同意三楼的意见，要有高比例的水，低流速冲柱才行~~
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新油条
5楼2011-06-14 10:13:21
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leecius

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢！ 2011-06-14 12:34:27
引用回帖:
Originally posted by 泉泽水 at 2011-06-14 00:06:27:
本人现在用的是Agilent1200，最近呢，很奇怪，老是在做完实验后，要换上30%乙腈水冲柱子，在排水时，压力会很高很高。我用的流动相时0.025mol/l的磷酸二氢钾（用氢氧化钠调pH至6.0）与乙腈走梯度。走一天样之后冲 ...

我想楼主的情况与冲洗的方式没有太大的关系，与盐浓度有一定的关系。首先，反相C18柱尽量避免用纯水冲洗（AQ柱除外哈），因为当疏水性的C18链遇到纯水时由于斥力会使C18链发生部分不可逆的倾覆，从而会导致柱效缓慢下降，要加入少许有机相调节，也可将缓冲液换成等比例的水。1200上的冲洗阀ptee滤芯堵塞，楼主可以看看是不是泵里的密封垫磨损过快而造成的，这点的可能性比较大；另外楼主的缓冲液的pH是6.0，这个环境容易长菌，也会导致系统的堵塞，楼主可以排除一下，祝你早点解决问题。
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心似白云常自在，意如流水任东西。
6楼2011-06-14 10:40:06
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢！ 2011-06-14 12:34:37
引用回帖:
Originally posted by 泉泽水 at 2011-06-14 00:06:27:
本人现在用的是Agilent1200，最近呢，很奇怪，老是在做完实验后，要换上30%乙腈水冲柱子，在排水时，压力会很高很高。我用的流动相时0.025mol/l的磷酸二氢钾（用氢氧化钠调pH至6.0）与乙腈走梯度。走一天样之后冲 ...

我可据我的积累和你说几点，一是缓冲盐本身有可能很脏，最好换上0.22的膜过滤，还有就是接近中性的缓冲盐如果在室温20度左右或以上的条件下进行实验，很容易长菌，上午刚滤好是澄清的，不信下午观察一下，已经长毛了。不堵才怪。
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gwmgyp
7楼2011-06-14 12:32:09
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢指教！ 2011-06-14 18:49:25
磷酸盐很容易长菌，尤其是夏天。最好临用现配。
还有冲柱子最好也用梯度，先是大比例的水最后过渡成大比例的有机相（比例50%的时间一定要短，因为在40%~60%这阶段粘度大，压力会很高）。
几天不用（周末）时，最好用纯水（不接柱子）冲洗系统把有可能析出的盐洗净。再用80%或纯甲醇保存系统避免长菌。
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学无止境
8楼2011-06-14 14:15:54
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泉泽水

铜虫 (初入文坛)
我的水相是每天早上现配的，我用的是苯基柱，柱子倒是没有什么事情，就是那个泵芯把我都要整崩溃啦，每天早上来都是先把泵芯弄下来超声，换一个前一天换下来的，我打电话给Agilent公司的客服，说的管路脏，我昨天就用0.5的流量冲管路一晚上，第二天，用甲醇过度到我的水相，还是堵啦，所以又把泵芯给卸啦。马上就好啦。我晕，我都要被它给正崩溃啦，盐的浓度我也调整到啦0.01的啦。一会做完实验冲冲看看是怎么样。
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学习，做自己。
9楼2011-06-15 20:36:32
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