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泉泽水

铜虫 (初入文坛)

[求助] Agilent1200片芯堵

本人现在用的是Agilent1200,最近呢,很奇怪,老是在做完实验后,要换上30%乙腈水冲柱子,在排水时,压力会很高很高。我用的流动相时0.025mol/l的磷酸二氢钾(用氢氧化钠调pH至6.0)与乙腈走梯度。走一天样之后冲柱子时就会堵,把白色的片芯拿出来超声或者换个新的就好啦,很郁闷,所以想问问大家是什么原因。盐浓度,我试过用0.01mol/ml的浓度也是堵。请大家帮帮忙,要是遇到有类似的经验的话,请提点提点,谢谢。
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-06-14 12:34:37
引用回帖:
Originally posted by 泉泽水 at 2011-06-14 00:06:27:
本人现在用的是Agilent1200,最近呢,很奇怪,老是在做完实验后,要换上30%乙腈水冲柱子,在排水时,压力会很高很高。我用的流动相时0.025mol/l的磷酸二氢钾(用氢氧化钠调pH至6.0)与乙腈走梯度。走一天样之后冲 ...

我可据我的积累和你说几点,一是缓冲盐本身有可能很脏,最好换上0.22的膜过滤,还有就是接近中性的缓冲盐如果在室温20度左右或以上的条件下进行实验,很容易长菌,上午刚滤好是澄清的,不信下午观察一下,已经长毛了。不堵才怪。
gwmgyp
7楼2011-06-14 12:32:09
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韩柳

金虫 (小有名气)

超级金虫

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 3Q 2011-06-14 18:49:08
可以用20%的乙醇冲柱子,或者用纯水,我们实验室都这样冲柱子的。
交论坛可交之人
2楼2011-06-14 02:22:33
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-06-14 12:34:00
冲柱时试试调低一点乙腈的比例,用90%水看看,但不要用纯水,不是所有色谱柱都能耐纯水。
堵的原因,大多是有机相比例高致使缓冲液中的盐析出。
另外,降低缓冲液中盐含量,会影响分析么?用0.01M~0.02M试试看,若有标准已规定用0.025M,那就算了。
守候在风中的宁静。
3楼2011-06-14 08:23:27
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zhihua0207

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-06-14 12:34:11
楼主冲柱为什么不用5%甲醇-水呢,因为你溶液中含盐量比较高,而且还用的磷酸二氢钾,这玩意儿太毁柱子了,而且堵泵芯(就是你说的片芯吧,呵呵  我们都这么叫)也是常事,你配流动相的话现用现抽滤,我们一般5、6天才换一次,一般超声的话堵得轻的还行,最好找老师要新的,呵呵
冲柱尽量用含水量较高的有机相冲(水相大于95%),免得盐析出来,还有就是一定要接预柱(保护柱),定期冲系统和旁路
立志改变,勇于超越
4楼2011-06-14 08:28:22
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