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lijunj

金虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌中表达外源蛋白补加葡萄糖 已有1人参与

各位大侠,大家好。最近在大肠杆菌中表达一真核基因蛋白,表达量很少,还有少量的本底表达,查阅PET表达手册,有一条是在培养基中补加1%的葡萄糖。请问有没有人做过?这里的1%是什么意思?什么时候补加效果最好?谢谢!
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我是一只小小的鸟儿,希望通过自己早起,有份吃的
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haooy111

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 欢迎新虫交流。能不能说得详细些呢? 2011-06-12 17:58:41
本帖内容被屏蔽

2楼2011-06-11 15:18:17
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wuzuobin125

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

没有做过,我的个人理解,觉得是葡萄糖在培养基中的浓度是1%。
3楼2011-06-12 11:34:21
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lijunj

金虫 (小有名气)

恩,我试过了,加上之后,反而,没有目的蛋白的表达了
我是一只小小的鸟儿,希望通过自己早起,有份吃的
4楼2011-06-19 23:00:13
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roomofxw

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

加葡萄糖是为了抑制本底表达对e.coli的伤害
在诱导开始时,差不多葡萄糖消耗完毕,再加入IPTG诱导外源蛋白表达。
5楼2011-06-20 10:29:13
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无限美好

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你妹子的,楼上说了没说,我来说。所谓的1%是指你加1g葡萄糖,然后定容到100mL就可以了。
未婚
6楼2015-06-11 12:22:37
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