应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 基因组提取
51/1返回列表
查看: 1966  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

甜酒慢品

金虫 (初入文坛)

小木虫

[求助] 基因组提取

我用了老板从国外带回来的一种光合细菌提取基因组，菌名为chloroflexus，但是用CTAB法提的时候发现它出现一种黏黏的东西，以至于提不出基因组。由于资料显示该菌是革兰氏阴性的，所以我尚未用溶菌酶处理，大家有谁有过相似经历，或者有好的解决办法，帮我解决一下，好吗？不甚感激！
回复此楼

» 猜你喜欢
还是那个我，简单，哀愁，幸福，疲惫。。。
1楼 2011-05-30 09:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清水一杯

新虫 (初入文坛)
1. 粘稠物质为多糖；可以加溶菌酶，但对G-菌而言，效果并不明显，CTAB就已经够了；
2. 发酵液离心后收集菌体，再用STE悬浮菌体，再离心收集；
3. 减少菌体的用量或加大裂解液的用量；
4. CTAB温浴后最好冷却至室温或4度再抽提；酚/氯仿至少抽提2次，建议加入酚/氯仿后横握离心管，以平放的8字形摇动离心管，这样既可充分使有机相/无机相混匀，又不至于使DNA断裂成小片段，持续不短于5min；
5. 吸取水相时要注意不吸上沉淀，这个你懂的；
6. 最后沉淀时加入异丙醇，混匀后室温静置10min，吸/捞出絮状沉淀，溶于TE或水，OD260/280应该在1.9左右。
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-08-24 17:42:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

xulanzzz

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

甜酒慢品(金币+1): 谢谢，我今天就试试！ 2011-05-30 11:08:38
引用回帖:
Originally posted by 甜酒慢品 at 2011-05-30 09:40:58:
我用了老板从国外带回来的一种光合细菌提取基因组，菌名为chloroflexus，但是用CTAB法提的时候发现它出现一种黏黏的东西，以至于提不出基因组。由于资料显示该菌是革兰氏阴性的，所以我尚未用溶菌酶处理，大家有谁 ...

即使是革兰氏阴性菌，还是需要溶菌酶处理一下的。。
赞一下 回复此楼
DOBEST
2楼2011-05-30 10:46:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
正纳闷G-为什么就不用溶菌酶~
赞一下 回复此楼
仕不可不弘毅，任重而道远
3楼2011-05-30 12:02:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

甜酒慢品

金虫 (初入文坛)

小木虫
引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2011-05-30 12:02:50:
正纳闷G-为什么就不用溶菌酶~

我感觉这个菌还含有其他类似于荚膜之类的东西，那团黏黏的东西应该有不少多糖之类的成分，当然这还只是推测，还有待下一步验证。
赞一下 回复此楼
还是那个我，简单，哀愁，幸福，疲惫。。。
4楼2011-05-30 13:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:16 by k06BKNblrGRH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 5/250 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:52 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:28 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:14 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 8/400 2026-09-17 02:52 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-17 02:50 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:28 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:14 by Tql5LQhh5rLK
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 8/400 2026-09-17 02:04 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 01:52 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-17 01:50 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-16 22:40 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 5/250 2026-09-16 21:39 by MHf40yA0Uhyb
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yaCh4X3wd045 2026-09-14 3/150 2026-09-16 20:39 by MHf40yA0Uhyb
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-16 18:36 by rRvxEj3zorCy
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-16 18:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭