应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 基因组提取
81/1返回列表
查看: 1904  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

甜酒慢品

金虫 (初入文坛)

小木虫

[求助] 基因组提取

我用了老板从国外带回来的一种光合细菌提取基因组，菌名为chloroflexus，但是用CTAB法提的时候发现它出现一种黏黏的东西，以至于提不出基因组。由于资料显示该菌是革兰氏阴性的，所以我尚未用溶菌酶处理，大家有谁有过相似经历，或者有好的解决办法，帮我解决一下，好吗？不甚感激！
回复此楼

» 猜你喜欢
还是那个我，简单，哀愁，幸福，疲惫。。。
1楼 2011-05-30 09:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xulanzzz

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

甜酒慢品(金币+1): 谢谢，我今天就试试！ 2011-05-30 11:08:38
引用回帖:
Originally posted by 甜酒慢品 at 2011-05-30 09:40:58:
我用了老板从国外带回来的一种光合细菌提取基因组，菌名为chloroflexus，但是用CTAB法提的时候发现它出现一种黏黏的东西，以至于提不出基因组。由于资料显示该菌是革兰氏阴性的，所以我尚未用溶菌酶处理，大家有谁 ...

即使是革兰氏阴性菌，还是需要溶菌酶处理一下的。。
赞一下 回复此楼
DOBEST
2楼2011-05-30 10:46:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
正纳闷G-为什么就不用溶菌酶~
赞一下 回复此楼
仕不可不弘毅，任重而道远
3楼2011-05-30 12:02:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

甜酒慢品

金虫 (初入文坛)

小木虫
引用回帖:
Originally posted by 墨香若水 at 2011-05-30 12:02:50:
正纳闷G-为什么就不用溶菌酶~

我感觉这个菌还含有其他类似于荚膜之类的东西，那团黏黏的东西应该有不少多糖之类的成分，当然这还只是推测，还有待下一步验证。
赞一下 回复此楼
还是那个我，简单，哀愁，幸福，疲惫。。。
4楼2011-05-30 13:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smiled001

禁虫 (小有名气)
甜酒慢品(金币+5): 2011-06-02 10:04:05
甜酒慢品(金币+2): 2011-06-04 20:37:40
本帖内容被屏蔽
5楼2011-05-30 23:51:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyy229

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

甜酒慢品(金币+1): 2011-06-02 10:04:16
甜酒慢品(金币+1): 2011-06-04 20:37:48
细菌不知道 真菌基因组提取出来就是那种黏黏的透明状东东啊 纯化一下就OK了
赞一下 回复此楼
6楼2011-06-01 11:47:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xl_yang1987

新虫 (初入文坛)
加点蛋白酶k，因为光合细菌有60~80%的菌体为蛋白质，你看到的粘稠的白色状的东西是未除尽的蛋白质。
赞一下 回复此楼
7楼2011-08-24 11:02:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清水一杯

新虫 (初入文坛)
1. 粘稠物质为多糖；可以加溶菌酶，但对G-菌而言，效果并不明显，CTAB就已经够了；
2. 发酵液离心后收集菌体，再用STE悬浮菌体，再离心收集；
3. 减少菌体的用量或加大裂解液的用量；
4. CTAB温浴后最好冷却至室温或4度再抽提；酚/氯仿至少抽提2次，建议加入酚/氯仿后横握离心管，以平放的8字形摇动离心管，这样既可充分使有机相/无机相混匀，又不至于使DNA断裂成小片段，持续不短于5min；
5. 吸取水相时要注意不吸上沉淀，这个你懂的；
6. 最后沉淀时加入异丙醇，混匀后室温静置10min，吸/捞出絮状沉淀，溶于TE或水，OD260/280应该在1.9左右。
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-08-24 17:42:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 甜酒慢品 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 12/600 2026-08-12 01:27 by 南京中西医
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭