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biofeixue

木虫 (著名写手)


[交流] 用来沉淀RNA的75%乙醇的DEPC水是用哪种方法配制的?

用来沉淀RNA的75%乙醇的DEPC水是用以下哪种方法配制的?
1.  100ml锥形瓶内装40ml双蒸水,加40ulDEPC,37℃过夜,送至高压。提RNA时,再用100%的乙醇与DEPC水按3:1的体积比配置;
2.  先配置DEPC水,不用灭菌。再用100%的乙醇与DEPC水按3:1的体积比配置;一段时间(一般12小时左右)后再高压灭菌。
请问哪种方法好?第二种高压后,乙醇还能是75%吗?
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cellline

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-30 12:38:44
引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-29 06:42:53:
用来沉淀RNA的75%乙醇的DEPC水是用以下哪种方法配制的?
1.  100ml锥形瓶内装40ml双蒸水,加40ulDEPC,37℃过夜,送至高压。提RNA时,再用100%的乙醇与DEPC水按3:1的体积比配置;
2.  先配置DEPC水,不用灭菌 ...

方法按第一种,但后面要做调整,不是将两种液体按体积混合就完事,正确的操作是:在经DEPC处理的有刻度(如100ml)的瓶子(我一般用血清瓶)加入新开瓶的纯乙醇至75ml,然后在加入经DEPC处理的水,至总体积100ml。
10楼2011-05-29 23:37:09
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cdl007

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
biofeixue(金币+1):谢谢参与
biofeixue(金币+2): 2011-05-29 08:05:20
dhd997(金币+2): 鼓励一下 2011-05-29 09:34:45
当然是灭depc水,后与乙醇配制。

要求一般是乙醇要新开瓶的,包括异丙醇。氯仿等,最好都是新开瓶的
3楼2011-05-29 07:48:54
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风雪苍鹰

银虫 (初入文坛)


★ ★
biofeixue(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 乙醇过滤即可 2011-06-02 20:22:43
引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-29 06:42:53:
用来沉淀RNA的75%乙醇的DEPC水是用以下哪种方法配制的?
1.  100ml锥形瓶内装40ml双蒸水,加40ulDEPC,37℃过夜,送至高压。提RNA时,再用100%的乙醇与DEPC水按3:1的体积比配置;
2.  先配置DEPC水,不用灭菌 ...

高压乙醇,你还想活么?
4楼2011-05-29 10:03:50
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muzihai

银虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+2): 对头 2011-06-02 20:22:13
我最近也提取RNA,先配的DEPC水高压之后配75%乙醇,一般都现配现用,感觉还行
5楼2011-05-29 10:52:05
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