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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用来沉淀RNA的75％乙醇的DEPC水是用哪种方法配制的？
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biofeixue

木虫 (著名写手)

[交流] 用来沉淀RNA的75％乙醇的DEPC水是用哪种方法配制的？

用来沉淀RNA的75％乙醇的DEPC水是用以下哪种方法配制的？
1.  100ml锥形瓶内装40ml双蒸水，加40ulDEPC，37℃过夜，送至高压。提RNA时，再用100%的乙醇与DEPC水按3：1的体积比配置；
2.  先配置DEPC水，不用灭菌。再用100%的乙醇与DEPC水按3：1的体积比配置；一段时间（一般12小时左右）后再高压灭菌。
请问哪种方法好？第二种高压后，乙醇还能是75%吗？
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1楼 2011-05-29 06:42:53
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cellline

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-30 12:38:44
引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-29 06:42:53:
用来沉淀RNA的75％乙醇的DEPC水是用以下哪种方法配制的？
1.  100ml锥形瓶内装40ml双蒸水，加40ulDEPC，37℃过夜，送至高压。提RNA时，再用100%的乙醇与DEPC水按3：1的体积比配置；
2.  先配置DEPC水，不用灭菌 ...

方法按第一种，但后面要做调整，不是将两种液体按体积混合就完事，正确的操作是：在经DEPC处理的有刻度（如100ml）的瓶子（我一般用血清瓶）加入新开瓶的纯乙醇至75ml，然后在加入经DEPC处理的水，至总体积100ml。
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10楼2011-05-29 23:37:09
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cdl007

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
biofeixue(金币+1):谢谢参与
biofeixue(金币+2): 2011-05-29 08:05:20
dhd997(金币+2): 鼓励一下 2011-05-29 09:34:45
当然是灭depc水，后与乙醇配制。

要求一般是乙醇要新开瓶的，包括异丙醇。氯仿等，最好都是新开瓶的
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3楼2011-05-29 07:48:54
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风雪苍鹰

银虫 (初入文坛)
★ ★
biofeixue(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1): 乙醇过滤即可 2011-06-02 20:22:43
引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-29 06:42:53:
用来沉淀RNA的75％乙醇的DEPC水是用以下哪种方法配制的？
1.  100ml锥形瓶内装40ml双蒸水，加40ulDEPC，37℃过夜，送至高压。提RNA时，再用100%的乙醇与DEPC水按3：1的体积比配置；
2.  先配置DEPC水，不用灭菌 ...

高压乙醇，你还想活么？
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-05-29 10:03:50
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muzihai

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+2): 对头 2011-06-02 20:22:13
我最近也提取RNA，先配的DEPC水高压之后配75%乙醇，一般都现配现用，感觉还行
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-05-29 10:52:05
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