24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2562  |  回复: 1
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-28 22:09:47
biofeixue(金币+10): 非常感谢! 2011-05-29 04:26:53
引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-28 16:08:47:
看到很多文章里写用rRNA做内参的?不知道怎么做内参?内参不是用来标定各样品的cDNA量是不是一致的吗?如果用rRNA做内参,rRNA在反转录时,不能转录成cDNA,它又怎么来标定模板是不是一样的呢?

18s rRNA作为内参标准在RT-PCR运用中,以稳定表达著称。其优于GAPDH和beta-actin。

oligo(dT)反转录不能用18s rRNA作为内参,随机引物可以!

18SrRNA虽然不会有蛋白表达,但是它会反转,形成18S核糖体RNA


  90%以上的RT-PCR应用单一的内参基因来校正与标准化目标基因的表达,其中最常用的包括GAPDH、β-actin、18S rRNA和28S rRNA等。

GAPDH mRNA在不同癌组织(包括肺癌、乳腺癌、肾细胞癌等)中的表达升高 ,在不同个体间、怀孕期间以及细胞周期的不同阶段等变化很大

当细胞向恶性转化时,β-actin mRNA的表达水平增加;而假基因的的存在也可干扰β-actin的检测。

rRNA用作内参还有如下缺点:① 当对已纯化mRNA中的目标基因进行定量时,rRNA不能用于标准化;②rRNA高丰度表达,远远高于目标mRNA,较其他内参基因稳定且受RNA降解的影响较小;③ rRNA不包括poly(A)尾,在以oligo(dT)为引物的cDNA合成中不能被逆转录。


更详细的东西可以看看这个网址,总结的非常好http://www.bioask.cn/html/1100.html

2楼2011-05-28 19:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

相关版块跳转 我要订阅楼主 biofeixue 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +7 喽哈加油 2026-04-13 8/400 2026-04-19 20:21 by Equinoxhua
[考博] 申博自荐 +4 Linxia林夏 2026-04-13 4/200 2026-04-19 19:55 by Equinoxhua
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +5 白云123456789 2026-04-13 5/250 2026-04-19 18:12 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-19 17:16 by 中豫男
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +10 lzmk 2026-04-14 11/550 2026-04-19 16:42 by 中豫男
[考研] 307中医考研调剂 +9 于以采蘩 2026-04-14 9/450 2026-04-19 08:41 by 烟雨流涯
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考博] 申博/考博 +3 啃面包的小书虫 2026-04-17 4/200 2026-04-17 23:54 by 阳阳阳^_^
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
信息提示
请填处理意见