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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问如何获得浓缩的细菌病毒(噬菌体)
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caihy119

银虫 (正式写手)

[求助] 请问如何获得浓缩的细菌病毒(噬菌体)

请问如何获得浓缩的细菌病毒(噬菌体),用于提取基因组DNA测序, 大家用什么试剂盒,效果如何,谢谢!
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1楼2011-05-26 17:55:08
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cloudwin

金虫 (小有名气)
★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-04 05:47:44
不知你的是什么phage，我们实验室用的T7 phage， 先去菌用普通离心机，然后是超离，beckman的仪器，是 sw28 转子 26000rpm，2h 离心后，收沉淀。可以得到很多phage颗粒。
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7楼2012-10-03 08:40:32
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xyzg198891

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+10, EPI+1): 处女帖，鼓励发帖交流，欢迎常来生物综合版 2011-05-27 11:50:51
caihy119(金币+2): 2011-05-27 15:38:08
先用PEG8000沉淀，然后再超高速离心获得病毒。重悬以后用蔗糖密度梯度离心纯化，最后洗糖就可以得到比较纯的病毒。用来提核酸就可以了。
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Don'tbeevil!
2楼2011-05-27 11:16:00
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caihy119

银虫 (正式写手)
谢谢回复,能具体一点吗, 比如l超速离心速度,时间, l超速离心完成后,如何透析等, 文献上是用Slide-A-Lyzer 30K MWCO dialysis cassettes (Pierce)透析的, 有没有人用过
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3楼2011-05-27 14:57:59
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xyzg198891

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

caihy119(金币+3): 2011-06-28 10:27:46
28000-32000rpm, 1-1.5h (Beckman)
我们实验室不透析，直接用TE、PBS或者双蒸水重悬后再离心一次去掉蔗糖。
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Don'tbeevil!
4楼2011-06-28 10:15:41
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