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caihy119

银虫 (正式写手)

[求助] 请问如何获得浓缩的细菌病毒(噬菌体)

请问如何获得浓缩的细菌病毒(噬菌体),用于提取基因组DNA测序, 大家用什么试剂盒,效果如何,谢谢!
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xyzg198891

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+10, EPI+1): 处女帖,鼓励发帖交流,欢迎常来生物综合版 2011-05-27 11:50:51
caihy119(金币+2): 2011-05-27 15:38:08
先用PEG8000沉淀,然后再超高速离心获得病毒。重悬以后用蔗糖密度梯度离心纯化,最后洗糖就可以得到比较纯的病毒。用来提核酸就可以了。
Don'tbeevil!
2楼2011-05-27 11:16:00
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caihy119

银虫 (正式写手)

谢谢回复,能具体一点吗, 比如l超速离心速度,时间, l超速离心完成后,如何透析等, 文献上是用Slide-A-Lyzer 30K MWCO dialysis cassettes (Pierce)透析的, 有没有人用过
3楼2011-05-27 14:57:59
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xyzg198891

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

caihy119(金币+3): 2011-06-28 10:27:46
28000-32000rpm, 1-1.5h (Beckman)
我们实验室不透析,直接用TE、PBS或者双蒸水重悬后再离心一次去掉蔗糖。
Don'tbeevil!
4楼2011-06-28 10:15:41
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huayuhui

新虫 (初入文坛)

可以去看看分子克隆第三版啊,上面很详细的
5楼2011-08-08 15:55:24
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10710010234

铁虫 (小有名气)

有用,谢谢
烈日炎炎,我依旧呆在实验室
6楼2012-08-04 23:05:51
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cloudwin

金虫 (小有名气)

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-04 05:47:44
不知你的是什么phage,我们实验室用的T7 phage, 先去菌用普通离心机,然后是超离,beckman的仪器,是 sw28 转子 26000rpm,2h 离心后,收沉淀。可以得到很多phage颗粒。
7楼2012-10-03 08:40:32
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匿名

本帖仅楼主可见
8楼2018-09-10 18:30:47
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