24小时热门版块排行榜    

查看: 2842  |  回复: 30
本帖产生 2 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

良缘百合

金虫 (正式写手)

[求助] 大家帮我看看我的DGGE图怎么了

最近DGGE条带一直是2-3条,我的样品是土壤,应该至少有一、二十条才对的,这到底是为什么啊?
求有经验的虫友帮忙分析一下啊,多谢多谢多谢……

DGGE前PCR,条带约230bp

下面是DGGE的一些条件、DGGE前PCR图片和DGGE图片:
8%gel,40%-60%的变性梯度,10%APS 80 ul、TEMED 16 ul;
25 ul样品和5 ul 6×loading buffer;
60摄氏度,75V 13h;
EB染色30min。


回复此楼
爱家人爱学习爱生活
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyixmu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 在雨中 at 2011-05-29 19:46:11:
应该是你的胶出问题了。
LS的图,那个梯度进样器,对着我们的那一面 有“this side for high density solution"的一面其实是要放”低梯度胶“,比如你的所谓40%的胶,而非60%。不要被这些文字迷惑了眼睛哦! ...

您好。我看论坛里你做DGGE经验比较丰富,想请教一些问题,希望能给我回复一下,谢谢!
我做的DGGE图,样品是细菌。胶浓度是40%-60%.最后条带大多集中在中部,上面和下面都没有。感觉条带很集中,我想让条带开一点,你觉得是应该高浓度和低浓度之间的范围该大点还是小点呢?
还有,预电泳的作用是什么呀?应该在上样前还是上样后预电泳呀?
非常感谢!希望您能给我回复,祝你实验顺利
don'tworry,behappy!
15楼2011-09-20 13:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 31 个回答

良缘百合

金虫 (正式写手)

顶一下

恳请虫友帮忙啊 谢谢
爱家人爱学习爱生活
2楼2011-05-26 19:13:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

良缘百合

金虫 (正式写手)

继续求助中……
爱家人爱学习爱生活
3楼2011-05-27 23:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


良缘百合(金币+2): 2011-05-28 08:25:03
adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-16 16:35:39
电泳时间太长了吧。
4楼2011-05-28 00:23:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见