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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 这个大峰是溶剂峰吗，为什么会这么的大？请教大家！
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yzhlasiI

铁虫 (正式写手)

[求助] 这个大峰是溶剂峰吗，为什么会这么的大？请教大家！

这个超大的峰难道是传说中的溶剂峰或鬼峰吗！？？

小弟做的实验主要是测酶活和抑制剂对酶的抑制效果，流动相：0.8%乙腈，20mM三乙胺，用醋酸调PH到6.0，波长259nm。

第一天测的样品很正常，几个峰都能分开，产物出峰时间在6.3min左右。



但是第二天，在酶反应体系中加入了极少量的DMSO后，就在3.3min左右出现了一个非常大的峰，很怪异！我测过，DMSO在259nm波长处基本上是无吸收的，我重复了很多次，这个峰一直都出现。



这个突然出现的大峰是溶剂峰吗，为什么会这么的大，这个峰的出现导致我的检测的结果很不准确，产物出的峰都成山丘一样凸起来的了，根本就不是尖的，大伙帮我看看是怎么回事吧。

[ Last edited by yzhlasiI on 2011-5-26 at 18:23 ]
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1楼 2011-05-26 17:34:43
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破土草儿

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yzhlasiI at 2011-05-27 17:34:38:
这位兄台说的有道理，我这个反应体系确实是图一中峰1、2是酶反应底物，1+2---->峰3，但是反应10分钟后，我用沸水煮了10分钟，使酶失活终止反应了，所以按道理，这个反应不能继续进行了。

关于图2，为什么 ...

你能够把图一中峰3的化学式贴出来吗？虽然你的酶反应体系终止了，不能保证体系氧化进行呀？我按照你的理解，你是加热灭活之后，再加抑制剂！这个有意思吗？难道图2是抑制剂的峰？但是解释不通图一中峰3为什么减少？我怀疑是峰3氧化变成了图二中的峰一。如果是柱子的问题，那我建议你冲洗一下柱子，再做一下，如果还是这个结果！那肯定是反应体系的问题！
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10楼2011-05-27 18:53:37
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你确定DMSO在259没有吸收，你可以进一针被稀释的DMSO，我以前用210nm时DMSO峰很大
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分离、分离
2楼2011-05-26 22:38:23
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

液相条件呢？
DMSO有时候基线不太好，但不会出现这样的溶剂峰。俺270nm液相DMSO无问题。
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守候在风中的宁静。
3楼2011-05-26 22:42:32
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢回复！ 2011-05-27 18:05:51
3.3min左右出现了一个非常大的峰

DMSO对保留时间有影响，3.3m可能为某主峰。。
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守候在风中的宁静。
4楼2011-05-26 22:45:33
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